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1970-01-01 08:00:00
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gelois

金虫 (正式写手)


★ ★
meihuayi: 金币+2, 谢谢你的关注,不知道你说的方法效果如何。我们实验室没这么做过,呵呵, 2012-09-27 19:35:11
你Step洗的浓度太大了,介意你将200mM咪唑Elu下来的Desalting成无咪唑的buffer重新过一次His柱,然后介意拉线性洗脱目的蛋白,如果条件有限不能拉线性的话,就把梯度变小,5mM,10mM,20mM,50mM,100mM.200,300,500,这样洗脱,ELU下来的目的蛋白就会比较纯。
这样之后再选取合适的合并过离子交换柱。因为看你的胶图片,有几条杂带离目的带很近,离子交换很难除,His的话或许可以。
你的PI值是6.1,那么阴离子的Buffer用7.5的就可以了,PH太高对蛋白也不好。过离子交换的话,也最好拉线性。
23楼2012-09-27 08:54:22
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once1015

木虫 (正式写手)



meihuayi(金币+1): 谢谢参与
实在太笼统,没办法给建议,希望你能把问题说详细一下。
比如 什么来源蛋白组分,蛋白组分的大概性质等
2楼2012-09-26 09:48:16
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blackdogzmz

木虫 (职业作家)



meihuayi(金币+1): 谢谢参与
虽然不懂,但帮顶一下,让别人来答........
4楼2012-09-26 10:51:46
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氢化大雪

木虫 (著名写手)



meihuayi(金币+1): 谢谢参与
可以根据蛋白所带的不同电荷来进行离子交换分离
7楼2012-09-26 12:44:39
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