24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 2280  |  回复: 23
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

1970-01-01 08:00:00
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

智能机器人

Robot (super robot)

我们都爱小木虫

找到一些相关的精华帖子,希望有用哦~

科研从小木虫开始,人人为我,我为人人

gelois

金虫 (正式写手)


★ ★
meihuayi: 金币+2, 谢谢你的关注,不知道你说的方法效果如何。我们实验室没这么做过,呵呵, 2012-09-27 19:35:11
你Step洗的浓度太大了,介意你将200mM咪唑Elu下来的Desalting成无咪唑的buffer重新过一次His柱,然后介意拉线性洗脱目的蛋白,如果条件有限不能拉线性的话,就把梯度变小,5mM,10mM,20mM,50mM,100mM.200,300,500,这样洗脱,ELU下来的目的蛋白就会比较纯。
这样之后再选取合适的合并过离子交换柱。因为看你的胶图片,有几条杂带离目的带很近,离子交换很难除,His的话或许可以。
你的PI值是6.1,那么阴离子的Buffer用7.5的就可以了,PH太高对蛋白也不好。过离子交换的话,也最好拉线性。
23楼2012-09-27 08:54:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 24 个回答

once1015

木虫 (正式写手)



meihuayi(金币+1): 谢谢参与
实在太笼统,没办法给建议,希望你能把问题说详细一下。
比如 什么来源蛋白组分,蛋白组分的大概性质等
2楼2012-09-26 09:48:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackdogzmz

木虫 (职业作家)



meihuayi(金币+1): 谢谢参与
虽然不懂,但帮顶一下,让别人来答........
4楼2012-09-26 10:51:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

氢化大雪

木虫 (著名写手)



meihuayi(金币+1): 谢谢参与
可以根据蛋白所带的不同电荷来进行离子交换分离
7楼2012-09-26 12:44:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见