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m606

铜虫 (正式写手)

[求助] 关于筛选菌种

近来筛选菌种,现在出现问题了:
    我是从酸菜或土壤中筛选乳酸菌(用于产GABA),我先把天然材料放入含有底物的MRS培养基中富集并检测GABA,发现有大量GABA生成,自认为应该是个优势菌,最起码有很多。然后对发酵液进行稀释涂布挑单菌落做斜面接种发酵检测,但是连着做两次了,每次都是挑取50左右菌种,就是没有挑取到目的菌,自己也很纳闷,分析原因:
    一,没有挑去到目的菌,但是,根据GABA生成量,感觉应该是优势菌,即便挑取的(选取合适稀释度平板,挑取所有菌落)量不是太大,但是就是没有挑取到。都是一样的培养基一样的条件。
    二,经过涂平板等传代,菌种酶活力下降丧失,感觉可能性不大。
请大家帮帮分析分析,自己感觉这个菌就在眼前,但是得不到,哎!
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wangdongd

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-09-25 09:46:01
你为何不直接用平板先筛选,再发酵呢?个人观点,你可能挑选的菌不是产GABA的菌,真正产的你没有找到。你还说先用稀释法,从平板做起吧。
2楼2012-09-25 09:17:33
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zzjcust

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-09-25 09:46:06
我感觉楼上说的对,应该是没有挑到目标菌株,直接平板挑菌,然后最好有试管摇床,或摇瓶发酵,看产物,最终得到目标菌株。
3楼2012-09-25 09:38:37
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m606

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wangdongd at 2012-09-25 09:17:33
你为何不直接用平板先筛选,再发酵呢?个人观点,你可能挑选的菌不是产GABA的菌,真正产的你没有找到。你还说先用稀释法,从平板做起吧。

这么做的方法是为了快速找到活力较强、酶活较高的菌种,直接平板法可能筛选了几批而没有结果。我的底物是30g/L,从接种到发酵还不到俩天,底物转化了大部分,我感觉发酵液里有这个活性的菌种是优势菌,只不过筛选两次没有筛选到有点意外,看来只能继续,或者从直接平板法开始了
4楼2012-09-25 10:16:12
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m606

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zzjcust at 2012-09-25 09:38:37
我感觉楼上说的对,应该是没有挑到目标菌株,直接平板挑菌,然后最好有试管摇床,或摇瓶发酵,看产物,最终得到目标菌株。

这么做的方法是为了快速找到活力较强、酶活较高的菌种,直接平板法可能筛选了几批而没有结果。我的底物是30g/L,从接种到发酵还不到俩天,底物转化了大部分,我感觉发酵液里有这个活性的菌种是优势菌,只不过筛选两次没有筛选到有点意外,看来只能继续,或者从直接平板法开始了
5楼2012-09-25 10:16:19
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aloon111

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

也可以先液体富集培养,再平板筛选。
汇天下之贤
6楼2012-09-28 09:15:54
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小梁同志

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by aloon111 at 2012-09-28 09:15:54
也可以先液体富集培养,再平板筛选。

你好,请问如何对乳酸菌进行液体富集培养?用什么富集培养基呢?谢谢,,
7楼2014-09-27 20:42:38
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