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yezinowhy

新虫 (初入文坛)

[求助] 免疫共沉淀的蛋白质提取

求助各位大侠,
最近我准备做免疫共沉淀,但以前没有做过。听说蛋白质提取非常重要,必须保证蛋白质的活性。
我拿到一个提取buffer的配方,请大家帮忙参谋一下。
Hepes-KOH, sucrose, glycerol, EDTA, Ascorbic acid, PVP K-25, DTT, BSA, 还有一些蛋白酶和磷酸酶抑制剂。
我得知DTT会破坏二硫键的形成,但是我看一些蛋白质提取kit里也含有这个成分,这是为什么呢?
BSA是用来干什么的呀?
哪位大侠能帮忙解释一下这些成分的作用吗? 这个配方能行吗?
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yezinowhy

新虫 (初入文坛)

追加一个问题,
有没有人用过kit来提取蛋白质。ReadyPrep ProteinExtration kit 有用过,这个提取的蛋白质可以用来做CoIP吗?
2楼2012-09-21 18:13:42
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