24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1017  |  回复: 3

2002ymx

铜虫 (初入文坛)

[求助] 实时定量PCR中提取RNA的问题

我现在正在做实时定量PCR,已将RNA提出。现有几个问题,希望帮助解答一下:
1.RNA提出后,我用DNA降解酶降解了一下,发现CDNA第一链合成试剂盒上说明还进行去除RNA的步骤,请问一定要做吗?
2.我想先用普通PCR先筛选一下引物,不用荧光PCR行吗?(我得去别的实验室借用荧光PCR),苦呀!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiyanwei1234

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
看天: 金币+3, 鼓励一下 2012-12-14 13:35:45
我不是专业的,只是接触过这方面的。
试剂盒上既然说了就做吧,可能提的不干净
第二个问题我不会,没用过荧光PCR
希望有其他专业的给你建议吧,你的问题我就有好多问题。sorry
龙飞凤舞
2楼2012-09-21 16:00:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hellohuo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
看天: 金币+3, 多谢回答 2012-12-14 13:36:04
2002ymx: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2013-01-06 08:45:34
第一个问题,我觉得按着试剂盒说的做应该问题不大,同意楼上的。至于第二个问题,我的师姐们告诉我在做实时定量之前有必要再做一次普通的PCR,来确定合适的引物以及优化PCR条件,这样再去做定量的时候就不会重复。毕竟做定量的费用要高于普通PCR的~
3楼2012-12-14 09:47:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2002ymx

铜虫 (初入文坛)

谢谢各位,我已做完荧光PCR,上面的问题已解决。
我的经验是:1尽量找好一些的试剂,我用过两种CDNA合成试剂盒,第一种特别浪费RNA,P的效果也不理想,后找了东洋坊的试剂盒就很理想,有人告诉我天根更好,但是考虑钱的方面我还是用了东洋坊的,真希望自己是大牛,这样花钱不愁,也能出好东西。
2.不耻下问,我们自己的实验室基本不做分子的实验,弄的我只能上别的实验室问,惨的是别的实验室也是做大田的,而我做的是树木,有时会到别的学校找人问,过程有点艰辛,但一切都是值得的。回顾以前的实验历程,如果我肯早一点开口问,可能实验会早半年完成。
4楼2013-01-06 08:27:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 2002ymx 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工(085600)296求调剂 +17 稻妻小编 2026-03-26 17/850 2026-03-29 19:07 by 学员8dgXkO
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +14 Mr. Z 2026-03-25 14/700 2026-03-29 17:27 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿211,335分,0856,求调剂院校和导师 +5 倾____萧 2026-03-27 6/300 2026-03-29 16:35 by 唐沐儿
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +7 李李不服输 2026-03-26 7/350 2026-03-29 16:25 by 学员8dgXkO
[考研] 300求调剂,材料科学英一数二 +9 leaflight 2026-03-24 9/450 2026-03-29 14:18 by wxiongid
[考研] 279求调剂 +4 蝶舞轻绕 2026-03-29 4/200 2026-03-29 09:45 by laoshidan
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +8 谷雨上岸 2026-03-23 9/450 2026-03-29 01:00 by 我是小康
[硕博家园] 求调剂 有机化学考研356分 +3 Nadiums 2026-03-25 4/200 2026-03-29 00:50 by 544594351
[考研] 295求调剂 +4 wei-5 2026-03-26 4/200 2026-03-28 23:20 by 小木虫tim
[考研] 生物学学硕,一志愿湖南大学,初试成绩338 +6 YYYYYNNNNN 2026-03-26 7/350 2026-03-28 20:52 by 唐沐儿
[考研] 291求调剂 +7 孅華 2026-03-22 7/350 2026-03-28 04:02 by fmesaito
[考研] 085601 材料工程 313分 求调剂 +5 Ong3 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:24 by goldfish51
[考研] 314求调剂 +3 溪云珂 2026-03-26 3/150 2026-03-27 11:20 by sanrepian
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
[考研] 282求调剂 +3 wcq131415 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:16 by userper
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 277分求调剂,跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
信息提示
请填处理意见