| ²é¿´: 773 | »Ø¸´: 6 | |||
[½»Á÷]
ÇóPCRʵÑéµÄÍÆ¼ö
|
|||
|
±¾ÈË×î½üÔÚѧPCR£¬ÇóÍÆ¼ö´Ë·½ÏòµÄºÃµÄ×ÊÔ´£¨Ö÷ÒªÊÇÊé¼®£© ÐèÒªµÄÊÇרÃŽ²½âPCRµÄ£¬ÄÚÈݹ㷺£¬¶ø²»ÊÇÔÚij±¾ÊéÖÐÖ»ÊÇÌáµ½ ×¢£ºÎÒÖ»ÏëÖªµÀ×ÊÔ´µÄÃû×Ö²¢²»ÊÇÏòËûÈËË÷Òª×ÊÔ´£¬ËùÒÔÇë°æÖ÷¼ø±ðºó²»ÒªÉ¾ [ Last edited by laqiwe on 2012-9-20 at 12:41 ] |
» ²ÂÄãϲ»¶
071000ÉúÎïѧÇóµ÷¼Á£¬³õÊԳɼ¨343
ÒѾÓÐ7È˻ظ´
0703»¯Ñ§µ÷¼Á£¬Çóµ¼Ê¦ÊÕ
ÒѾÓÐ8È˻ظ´
0856²ÄÁÏ»¯¹¤µ÷¼Á ×Ü·Ö330
ÒѾÓÐ11È˻ظ´
±¾¿ÆÐÂÄÜÔ´¿ÆÑ§Ó빤³Ì£¬Ò»Ö¾Ô¸»ªÀíÄܶ¯285Çóµ÷¼Á
ÒѾÓÐ9È˻ظ´
332Çóµ÷¼Á
ÒѾÓÐ4È˻ظ´
085600£¬×¨Òµ¿Î»¯¹¤ÔÀí£¬321·ÖÇóµ÷¼Á
ÒѾÓÐ3È˻ظ´
²ÄÁϹ¤³Ì294Çóµ÷¼Á
ÒѾÓÐ3È˻ظ´
295²ÄÁϹ¤³Ìר˶Çóµ÷¼Á
ÒѾÓÐ7È˻ظ´
305Çóµ÷¼Á
ÒѾÓÐ5È˻ظ´
ʳƷ¹¤³Ìר˶һ־ԸÖк£Ñó309Çóµ÷¼Á
ÒѾÓÐ8È˻ظ´
» ±¾Ö÷ÌâÏà¹Ø¼ÛÖµÌùÍÆ¼ö£¬¶ÔÄúͬÑùÓаïÖú:
RT-qPCRʵÑéÎÊÌâ
ÒѾÓÐ23È˻ظ´
Çó½âÊÍÕâpcrÊÇɶÎÊÌ⣬°ïͬѧÎʵÄ^_^
ÒѾÓÐ29È˻ظ´
ÇóPCRʵÑéÁ÷³Ì£¬Ð¡µÜÊǸöÐÂÊÖÇó¸ßÊÖÏàÖú
ÒѾÓÐ9È˻ظ´
PCRʵÑéÎÊÌâÇó½â
ÒѾÓÐ5È˻ظ´
Çó¸ßÊÖ°ïÎÒ·ÖÎöÏ PCR ʵÑéµçӾͼ£¬Ôõô¸ÄÉÆ£¡£¡£¡
ÒѾÓÐ6È˻ظ´
ÇóÖú ÍÁÈÀ»ùÒò×é PCR À©ÔöÎÊÌâ
ÒѾÓÐ30È˻ظ´
¡¾ÇóÖú/½»Á÷¡¿ÍÁÈÀDNAÌáÈ¡¼°PCR
ÒѾÓÐ20È˻ظ´
¡¾·ÖÏí¡¿Ó«¹â¶¨Á¿PCRʵÑéÖ¸ÄÏ£¨¶þ£©
ÒѾÓÐ12È˻ظ´
¡¾×¨Ìâ¡¿PCRʵÑé¼¼ÊõÖ¸ÄÏ
ÒѾÓÐ535È˻ظ´
» ÇÀ½ð±ÒÀ²£¡»ØÌû¾Í¿ÉÒԵõ½:
¡¾Ç¿ÍÆ£ü¿ÉÁôУ¡¿¼ÃÄÏ´óѧ²©Ê¿ºóÕÐÆ¸£¨Ë®Àû¹¤³Ì/ÌúÃÌ̼»·¾³¹ý³Ì£©
+1/287
º¸½ÓרҵӦ½ì±ÏÒµÉúÕÐÆ¸
+1/83
¸ÓÄÏʦ·¶´óѧФÐ˽ÌÊÚ¿ÎÌâ×éÕÐ2026¼¶µç×ÓÐÅϢ˶ʿ 4-6 Ãû£¬»¶Óµ÷¼Á
+1/82
ÄϾ©Ò½¿Æ´óѧÉúֳҽѧÓë×Ó´ú½¡¿µ¹úÖØÊµÑéÊÒ-¶·Éºê¿ÎÌâ×é-2026Ä격ʿÕÐÉú-9ÔÂÈëѧ
+1/82
Çൺũҵ´óѧº£ÑóѧԺÕе÷¼Á˶ʿÑо¿Éú
+1/73
ÄÏ·½ÓÍУ¡ª¡ª×ÊÔ´Óë»·¾³×¨Ë¶ÕÐÉú£¬»¯Ñ§»·¾³ÉúÎïÀàרҵ¾ù¿É£¬¾ÍÒµºÃ£¬ÓÐרҵ±ÚÀÝ
+1/47
¡¾È«¶î½±Ñ§½ð+Ó¢¹ú²©Ê¿Ñ§Î»¡¿¹ú¿Æ´óº¼¸ßÔºNathan¿ÎÌâ×éÕÐÊÕ2026¼¶ÁªÅ಩ʿÉú1Ãû£¡
+1/44
ÖÐɽ´óѧÉúÒ½¹¤Ñ§Ôº¿ÎÌâ×éÕÐ˶ʿÉú£¨ÄÉÃײÄÁÏ/¸ß·Ö×Ó/·ÖÎö´«¸Ð/Ó«¹âÃâÒß¼ì²â±³¾°£©
+2/38
08¿ªÍ·Óе÷¼ÁÐèÇóµÄͬѧ
+3/16
˫һÁ÷´óÑ§ÏæÌ¶´óѧ¡°»¯¹¤¹ý³ÌÄ£ÄâÓëÇ¿»¯¡±¹ú¼ÒµØ·½ÁªºÏ¹¤³ÌÑо¿ÖÐÐÄÕÐÊÕ¸÷À಩ʿÉú
+1/15
ÄêнԼ32-60Íò£¡³É»áÃ÷ԺʿÍÅ¶Ó³ÏÆ¸²ÄÁÏÀíÂÛ¼ÆË㲩ʿºó£¨³¤ÆÚÓÐЧ£©
+1/15
»¯Ñ§¡¢»¯¹¤¡¢»¯×±Æ·¡¢²ÄÁϱ³¾°¿¼Éúµ÷¼Á
+1/7
2026ÄêÖйú¿ÆÑ§Ôº³ÇÊл·¾³ËùÓ븣½¨Å©ÁÖ´óѧÁªºÏÅàÑøË¶Ê¿Ñо¿ÉúÏîÄ¿½éÉÜ
+1/6
¹þ¶û±õÒ½¿Æ´óѧÀîÀÏʦ¿ÎÌâ×éÕÐÊÕÉúÎïÐÅϢѧ·½Ïò²©Ê¿¡¢Ë¶Ê¿Ñо¿Éú
+1/6
¹þ¶û±õ¹¤Òµ´óѧ(ÉîÛÚ)¹ú¼Ò¼¶ÇàÄêÈ˲Żúе¹¤³Ì¡¢ÈÈÄÜÓëÄÜÔ´µÈרҵ26ÄêÈëѧ²©Ê¿ÕÐÉú
+1/5
Ä«¶û±¾´óѧ²®Ã÷º²´óѧÁªºÏÈ«½±¹ú¼Ê²©Ê¿Éú
+1/5
Õã½´óѧ¹ú¼Ê½¡¿µÒ½Ñ§Ñо¿ÔºÕÐÆ¸¿ÆÑÐÖúÀí
+1/5
ÖпÆÔº¿ÆÑÐÖúÀíÕÐÆ¸
+1/3
½ðÊô²ÄÁÏÏȽøÁ¬½Ó¼¼Êõ
+1/2
¹ã¶«¹¤Òµ´óѧ»·¾³¿ÆÑ§Ó빤³ÌѧԺÕÐÊÕ˶ʿµ÷¼Á
+1/1
dshlove
ľ³æ (ÕýʽдÊÖ)
- BioEPI: 9
- Ó¦Öú: 237 (´óѧÉú)
- ½ð±Ò: 4764.7
- Ìû×Ó: 852
- ÔÚÏß: 419.2Сʱ
- ³æºÅ: 1609389
2Â¥2012-09-20 09:54:16
3Â¥2012-09-20 10:19:44
4Â¥2012-09-20 11:15:39
5Â¥2012-09-20 20:42:54
¡ï ¡ï ¡ï ¡ï ¡ï
laqiwe(½ð±Ò+1): лл²ÎÓë
laqiwe: »ØÌûÖö¥ 2012-10-05 18:04:06
laqiwe: ½ð±Ò+4 2012-10-05 18:04:14
laqiwe(½ð±Ò+1): лл²ÎÓë
laqiwe: »ØÌûÖö¥ 2012-10-05 18:04:06
laqiwe: ½ð±Ò+4 2012-10-05 18:04:14
|
ʵÑéÆß ¾ÛºÏøÁ´·´Ó¦£¨PCR£©¼¼ÊõÌåÍâÀ©ÔöDNA Ä¿µÄ 1¡¢Ñ§Ï°PCR·´Ó¦µÄ»ù±¾ÔÀíºÍʵÑé¼¼Êõ¡£ 2¡¢Á˽âÒýÎïÉè¼ÆµÄÒ»°ãÒªÇó¡£ ÔÀí ¾ÛºÏøÁ´·´Ó¦£¨polymerase chain reaction£¬PCR£©ÊÇÌåÍâø´ÙºÏ³ÉDNAƬ¶ÎµÄÒ»ÖÖ¼¼Êõ¡£ÀûÓÃPCR¼¼Êõ¿ÉÔÚÊýСʱ֮ÄÚ´óÁ¿À©ÔöÄ¿µÄ»ùÒò»òDNAƬ¶Î£¬ÒÔÓÃÓÚ»ùÒò¹¤³Ì²Ù×÷¡£ PCR½øÐеĻù±¾Ìõ¼þ£º ¢ÅDNAÄ£°å£¨ÔÚRT-PCRÖÐÄ£°åÊÇRNA£©£» ¢ÆÒýÎ ¢ÇdNTP£¨dATP¡¢dTTP¡¢dGTP¡¢dCTP£© ¢ÈTaq DNA¾ÛºÏø PCRÑ»·ÓÉÈý¸ö²½Öè×é³É£º ¢Å±äÐÔ Ê¹Ä£°åDNA½âÀë³Éµ¥Á´£» ¢ÆÍË»ð ʹÒýÎïÓëÄ£°åDNAËùÐèÀ©ÔöÐòÁнáºÏ£» ¢ÇÑÓÉì DNA¾ÛºÏøÀûÓÃdNTPºÏ³ÉÓëÄ£°å¼î»ùÐòÁл¥²¹µÄDNAÁ´¡£ ÿһ¸öÑ»·µÄ²úÎï¿É×÷ΪÏÂÒ»¸öÑ»·µÄÄ£°å£¬Í¨¹ý30¸ö×óÓÒÑ»·ºó£¬Ä¿µÄƬ¶ÎµÄÀ©Ôö¿É´ï106±¶¡£ ÒýÎïÉè¼Æ£ºÒª±£Ö¤PCR·´Ó¦ÄÜ׼ȷ£¬ÌØÒ죬ÓÐЧµÄ¶ÔÒýÎïDNA½øÐÐÀ©Ôö£¬Í¨³£ÒýÎïÉè¼ÆÒª×ñÑÒÔÏÂÔÔò£º ¢ÅÒýÎﳤ¶È£º15~25¸öºËÜÕË᣻ ¢ÆCGº¬Á¿Îª40%~60%£» ¢ÇTmֵΪ55¡æ£¨Tm=4£¨C+G£©+2£¨A+T£©¼ÆË㣻 ¢ÈÒýÎïÓë·ÇÌØÒìÅä¶ÔλµãµÄÅä¶ÔÂÊСÓÚ70%£» ¢ÉÒýÎï×ÔÉíÅä¶ÔÐγɵľ¥»·½á¹¹£¬¾¥µÄ¼î»ù¶ÔСÓÚ3£¬ ¢ÊÁ½ÌõÒýÎï¼äÅä¶Ô¼î»ùÊýСÓÚ5¸ö¡£ ÓÉÓÚÓ°ÏìÒýÎïµÄÉè¼ÆµÄÒòËØ±È½Ï¶à£¬ËùÒÔ³£³£ÀûÓüÆËã»úÀ´¸¨ÖúÉè¼Æ¡£ ±¾ÊµÑéÒÔʵÑéÒ»ÖÐÌáÈ¡µÄÖÊÁ£DNAΪģ°å£¬½øÐÐPCRÀ©Ôö£¬´óÁ¿µÃµ½Ä¿µÄDNAƬ¶Î¡£ ÊÔ¼ÁÓëÆ÷²Ä Ò»¡¢ ÊÔ¼Á 1¡¢ Taq DNA¾ÛºÏø 2¡¢ 10¡Á·´Ó¦»º³åÒº£¨º¬25mmol MgCl2£© 3¡¢ dNTP 4¡¢ ÒýÎP1¡¢P2£© 5¡¢ äåÒÒà¤È¾É«Òº(EB)£º 10mg/mläåÒÒड£ ×¢Ò⣺¸ÃÊÔ¼Á¾ßÖ°©×÷Óã¬ÓÃʱҪСÐÄ¡£ 6¡¢ µãÑù»º³åÒºLoading buffer£¨10¡Á£©£º0.25%äå·ÓÀ¶£¬40%¸ÊÓÍ¡£ ¶þ¡¢ Æ÷²Ä 1¡¢ PCRÀ©ÔöÒÇ 2¡¢ µçÓ¾ÒÇ 3¡¢ ̨ʽÀëÐÄ»ú 4¡¢ ×ÏÍâ·ÖÎöÒÇ 5¡¢ ºãÎÂˮԡ 6¡¢ Äý½º³ÉÏñϵͳ ²Ù×÷²½Öè Ò»¡¢ PCRÀ©Ôö 1¡¢°´Ï±í¼ÓÈëÊÔ¼Á£¬²¢Ð¡ÐÄ»ìÔÈ¡£Ä£°åΪʵÑéÒ»ÖÐÌáÈ¡µÄÖÊÁ£DNA¡£ ÊÔ¼Á Ìå»ý£¨ 50ul£© ddH2O 35ul 10 x buffer 5ul 10¡ÁdNTP 5ul Primer P1 1ul Primer P2 1ul Ä£°å 2ul Taq ø£¨2.5U£© 1.0ul 2¡¢ÉèÖÃPCR³ÌÐò£º 94 ¡æ 180s 94 ¡æ 45s 35 cycles: 55¡æ 45s 72 ¡æ 60s 72 ¡æ 600s 3¡¢ÔËÐÐPCR³ÌÐò ¶þ¡¢ PCR²úÎï¼ø¶¨ ·´Ó¦½áÊøºó£¬È¡20ul PCR²úÎï½øÐÐ1.2%ÇíÖ¬ÌǵçÓ¾·ÖÎö¡£ Õâ¸öÒ²ÊÇÏÂÔØµÄ ¹©²Î¿¼ |
6Â¥2012-10-04 22:40:25
¼òµ¥»Ø¸´
wizardfan7Â¥
2012-10-05 07:39
»Ø¸´
laqiwe(½ð±Ò+1): лл²ÎÓë














»Ø¸´´ËÂ¥