18楼: Originally posted by reallpf at 2012-09-20 10:13:25
现做现用的感受态方法http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=4734449。如果着急做可以用你自己的方法，转化量加大点看有没有结果。
线性化完不用去磷酸化，直接cycle-pure回收（DNA片段直接回收试剂盒），胶回 ...

19楼: Originally posted by foxcl at 2012-09-20 14:22:16
1、OD600没有问题，初始在1.2-1.6都可以。剩下的做感受态也没啥问题。
　　不过最好现用现配。-80保存也是可以的。
２、线性化→ＤＮＡ清洁试剂盒回收（最后一步用６５度纯水洗脱，要是用ＴＥ的话，电转体系中盐离 ...

20楼: Originally posted by 475502411 at 2012-09-21 14:46:45
非常感谢
但是我昨天做的线性化，没有有加热的水洗脱，不过切了12微克的质粒，用25微升水洗脱的
我按你给我说的做一遍，转化后直接涂G418板，因为在MD板上长得好多，好小
希望能做出来
谢谢...

22楼: Originally posted by 475502411 at 2012-09-21 14:50:09
我之前直接用的点转仪上的参数，今天重新做，按你给我的参数做，有问题我在请教你
谢谢了...

23楼: Originally posted by foxcl at 2012-09-21 23:59:05
你的G418浓度多少？...