应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 原核表达氨基酸序列
41/1返回列表
查看: 868  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lixilei1314

金虫 (小有名气)

[交流] 原核表达氨基酸序列

如题，要做原核表达，然后纯化蛋白做抗原去制备抗体。现在扩出来的序列和最开始克隆基因的时候序列相比，氨基酸有个别差异（比如250个氨基酸的序列有2个差异）。挑了几个菌去测序都是这个问题。所以想请教一下大家，这种情况会影响后面的抗体功能吗？
个人分析其他原因是：也有可能是刚开始克隆基因的时候的序列有突变的原因，也或许是个体的SNP差异吧。
想请教一下大家对这个问题的看法！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-09-13 21:45:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangyhai

金虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
氨基酸有差异是扩增的酶保真性不够吧。是否SNP可以再uniprot里面看的。
赞一下 回复此楼
2楼2012-09-14 08:39:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixilei1314

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jiangyhai at 2012-09-14 08:39:31
氨基酸有差异是扩增的酶保真性不够吧。是否SNP可以再uniprot里面看的。

那如果是因为扩增酶的原因，那这两个氨基酸的差异还能继续制备抗体吗？主要觉得再重新做的话，时间浪费太多了。
赞一下 回复此楼
3楼2012-09-14 12:10:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小技术官

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
有影响，若不是关键的氨基酸还是可以的。制备抗体的时候，主要依靠抗原表位的免疫原性来刺激产生针对该表位的抗体。但是如果测序不正确，肯定会影响你SCI的影响因子的。
赞一下 回复此楼
4楼2012-09-14 13:18:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lixilei1314 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭