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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 工程大肠杆菌发酵出现异常，求高手指点
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lujiansheng1

银虫 (小有名气)

[交流] 工程大肠杆菌发酵出现异常，求高手指点 已有10人参与

本实验室现在有一工程大肠杆菌，发酵工艺非常成熟，在以前发酵时，通过诱导最后目的蛋白量都有正常表达，但是最近发酵出现异常，同样的条件在摇瓶中有表达，而在发酵罐中没有表达，且通过显微镜检查发现菌体出现自溶。我们原先分析是不是染菌或噬菌体，但是通过设计实验排除了感染噬菌体的可能性，而镜检也没有发现有染菌迹象，但是显微镜观察发现大肠杆菌杆比以前有明显变短现象。急求高人能够指点！在线等，谢谢！
另外，现在我们也排除了质粒的问题，通过测序发现质粒是好的，没有任何问题。
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大肠杆菌工程菌发酵

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1楼 2012-09-08 13:20:26
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小花木兰

银虫 (小有名气)
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在发酵过程中，不缺少氮源和糖的情况下同，无端端起泡沫，菌体OD降，自溶， 又不是染菌，什么原因呀呀  为什么总是说是噬菌体吗
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9楼2015-12-22 10:47:30
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zys1256

金虫 (初入文坛)
★
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可能是乙酸抑制了吧。补葡萄糖的工艺有待改进啊
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3楼2012-09-10 10:21:53
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普通回帖

xl0071334

至尊木虫 (著名写手)
★
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我们从去年开始也遇到过这种情况，还没有解决是什么原因，有什么具体的原因可以讨论一下
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2楼2012-09-09 17:10:55
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lihao1988903

金虫 (正式写手)
★
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我们也遇到过这种情况，后来重新提质粒转化后就没事了，具体什么原因也不太清楚。
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4楼2012-09-10 13:59:11
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404467415

银虫 (初入文坛)
★
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LZ怎么镜检发现菌体自溶的，是电子显微镜还是电子显微镜？能不能分享一下，其实你说的这种情况我们也遇到过，我们的做法就是筛选种子发酵又好了
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你把一生的赌注都压在我的身上，我怎能输？
5楼2014-11-04 11:19:40
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wind_king85

铜虫 (小有名气)
★
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很有意义的话题，希望能放大。工程大肠还是挺复杂的
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6楼2014-11-04 14:46:50
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553173045

铜虫 (初入文坛)
★
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菌体自溶在大肠里很容易发生，大家互相探讨下，什么原因导致的。长得好好的，突然变清！不像染噬菌体。
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没有完成不了的事，只有自己愿不愿意去做
7楼2014-12-11 10:10:19
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pomelolk

铜虫 (小有名气)
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引用回帖:
3楼: Originally posted by zys1256 at 2012-09-10 10:21:53
可能是乙酸抑制了吧。补葡萄糖的工艺有待改进啊

估计还没开始补糖就开始出现自溶现象了，我也遇到过
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8楼2015-12-18 16:08:54
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bugliuyun

铁虫 (小有名气)
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引用回帖:
9楼: Originally posted by 小花木兰 at 2015-12-22 10:47:30
在发酵过程中，不缺少氮源和糖的情况下同，无端端起泡沫，菌体OD降，自溶， 又不是染菌，什么原因呀呀  为什么总是说是噬菌体吗

小花木兰，见过你发好多帖子了。那么问你，你觉得他这是怎么回事啊？

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10楼2016-03-26 14:58:22
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