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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 急求解答关于在样品前处理中使用spe柱子的问题
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wonder书记

铁虫 (初入文坛)

[求助] 急求解答关于在样品前处理中使用spe柱子的问题

1,spe柱子使用前要活化和平衡。。我对活化的理解就是冲掉一些柱子中的杂质，可有童鞋指出活化的作用是使键合的吸附基团充分展开，并且排列整齐。。。求正解。。。还有什么是平衡，平衡的作用是什么，如何选择平衡溶液？？？？
2，spe柱子的原理可以用塔板理论和平衡理论来解释吗？？？还是很静态的“上样吸附，洗脱解吸”来解释。
3，听说c18的柱子不能干，是指活化之后上样之前要保持柱体湿润，还是上样之后洗脱之前必须湿润？？为什么不能晾干呢？
问题有点多，知道答案的大神是你吗？
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1楼 2012-09-07 19:14:43
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mhs236

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo: 金币+3, 感谢应助 欢迎常来分析版 ^^ 2012-09-08 00:05:52
1、活化主要是润湿吧 让吸附剂可以处于溶液环境中，更好的吸附目标物质，当然也可以冲掉一些杂质。活化的溶液用甲醇或者水就可以
2、关于原理方面，其实两个都是对的。SPE和我们用的柱层析、薄层层析，还有HPLC、GC等色谱方法的原理其实都是一样的。这两个其实是从不同的角度来解释的。
3、柱子不能干，就是说从活化开始就要保证吸附剂湿润，液面不要低于吸附剂。只有等洗脱液全部加完以后，才能抽干洗脱液。
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2楼2012-09-07 22:37:39
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wonder书记

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mhs236 at 2012-09-07 22:37:39
1、活化主要是润湿吧 让吸附剂可以处于溶液环境中，更好的吸附目标物质，当然也可以冲掉一些杂质。活化的溶液用甲醇或者水就可以
2、关于原理方面，其实两个都是对的。SPE和我们用的柱层析、薄层层析，还有HPLC、G ...

多谢，但是还不是很明白。你能在深入解释一下吗？
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3楼2012-09-08 14:35:31
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mhs236

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
soundhorizo: 金币+2, 感谢应助 鼓励交流 ^^ 2012-09-09 08:51:11
其实原理很简单，我们应该都做过叶绿素分离的实验吧，就是用展开剂，让叶绿素分开，不同的颜色的条带，所有这些原理其实都是这样的

不管是活化还是你后面说的不能干，都是为了让固定相保存在液相体系中，这样才能和你的洗脱液互选作用，根据作用的大小不同，达到分离目标物的目的
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4楼2012-09-09 08:25:42
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wonder书记

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by mhs236 at 2012-09-09 08:25:42
其实原理很简单，我们应该都做过叶绿素分离的实验吧，就是用展开剂，让叶绿素分开，不同的颜色的条带，所有这些原理其实都是这样的

不管是活化还是你后面说的不能干，都是为了让固定相保存在液相体系中，这样才能 ...

固相萃取时有没有这种可能呢？？。。。上样溶液太多，虽然固定相上键合的吸附基团没有达到饱和，但是依然能被上样溶液的溶剂自身洗脱了。。。不等洗脱液来洗脱，柱子就hold不住了
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5楼2012-09-10 15:17:44
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mhs236

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by wonder书记 at 2012-09-10 15:17:44
固相萃取时有没有这种可能呢？？。。。上样溶液太多，虽然固定相上键合的吸附基团没有达到饱和，但是依然能被上样溶液的溶剂自身洗脱了。。。不等洗脱液来洗脱，柱子就hold不住了...

理论上说是有这种可能 但是一般情况下不会发生的 我们用固相萃取 一个很大的原因就是想富集 也就是原本基质中目标物的浓度太低 过柱子就是想让浓度变高的 所以你说的情况一般不会发生的
而且 目标物质和固定相的作用力还是比较强的 不用合适的洗脱液 用其他溶液淋洗的话 不会洗脱下来的 这就是一般在洗脱前的淋洗步骤
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6楼2012-09-10 17:45:47
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