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枯草芽孢杆菌的染色实验
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请教各位老师：我想用染色法在显微镜下观察枯草芽孢杆菌的菌体和芽孢的形态，寻求具体的实验操作过程及染色方法，以前实验课没有学到这部分。 染色的是菌液，还是菌苔，活菌还是失死的，在多少倍显微镜下可以清晰看到。染色必须有染色和脱色过程吗，有没有什么染料滴到长满芽孢杆菌的固体培养基上就可以使芽孢杆菌着色？ 谢谢， 请赐教 |
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weiyasong
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scelab: 金币+3, MicEPI+1, 谢谢热心交流~ :) 2012-08-29 10:04:22
000002: 金币+20, 谢谢老师赐教，受益匪浅，我试试 2012-08-29 10:10:40
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芽孢杆菌染色可以用革兰氏染色和芽孢染色。至于菌液菌苔都可以，菌液直接在载玻片上涂抹，菌苔需要先在载玻片上滴加无菌生理盐水进行涂菌。干燥，固定，然后进行染色；具体是：（1）革兰氏染色：草酸铵结晶紫1-2min，革兰氏碘液1-2min，95%30s-1min，沙黄染液或者石炭酸复红30s，吸干或自然干燥，然后镜检（可以先低倍镜找视野，高倍镜观察，油镜看）。革兰氏阳性菌为蓝紫色，革兰氏阴性菌成粉红色，可见芽孢无色。（2）芽孢染色：有2种①复红美兰染色法：在固定好的载玻片上滴加石炭酸复红，加热至产生蒸汽，2-3min，水洗。以5%醋酸脱色，至淡红色为止，水洗。以骆（吕）氏美蓝液复染0.5min，水洗，吸干镜检。②孔雀绿染色法：在固定好的载玻片上滴加饱和的孔雀绿水溶液（7.6%）10min，水洗，用0.5%番红液或者沙黄液复染0.5min，水洗，镜检（同革兰氏染色法）。结果芽孢成绿色，菌体成粉红色。 至于在培养基上加染液看芽孢菌的，没做过，不太清楚…… |
2楼2012-08-29 09:56:20