24小时热门版块排行榜    

查看: 816  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lecou

新虫 (初入文坛)

[求助] 求大师指导下~最近一个月都在重复插目的片段可是结果很奇怪啊~

我用的是穿梭质粒ycp50,8k左右,用的bamH1 和hind3双酶切,将一个目的片段大约6k的插进去,可是已经做了一个月了,开始做双酶切和单酶切进行验证,但是都没有出现十几k的目的质粒,前几天设计了引物,pcr目的片段中的一段,约800bp,出现了目的条带,可是酶切确实阴性结果,这是怎么了?说的有点多,不知道能不能理解,希望高手指点下,不懂得细节再交流~
回复此楼
希望自己能平常心面对实验中的种种
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lecou

新虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 三十不惑 at 2012-08-29 20:08:01
你的PCR使用阴性对照了吗?你先排除一下PCR反应的假阳性吧

阴性对照阳性对照都有,结果也都正常,做了好几遍的pcr验证都一样~
希望自己能平常心面对实验中的种种
6楼2012-08-31 14:12:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

lecou

新虫 (初入文坛)

顶一下,怎么没人回啊,大家帮帮忙嘿嘿
希望自己能平常心面对实验中的种种
2楼2012-08-29 14:31:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三十不惑

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你的PCR使用阴性对照了吗?你先排除一下PCR反应的假阳性吧

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

个性签名
3楼2012-08-29 20:08:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 辛苦了 2012-08-30 14:36:22
单酶切14K你能看到?一般用marker最大只有10K。
双酶切试试吧
不过片段比较大,体系选择恰当些,不行就该酶切体系。只能酶切验证了!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼2012-08-29 21:07:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +10 纸鱼ly 2026-03-21 11/550 2026-03-24 17:22 by qingfeng258
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工 264分各科过A区国家线 +3 哈哈157349 2026-03-21 3/150 2026-03-24 14:11 by zhyzzh
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 341求调剂(一志愿湖南大学070300) +5 番茄头--- 2026-03-22 6/300 2026-03-23 23:45 by Txy@872106
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +6  ̄^ ̄゜汗 2026-03-19 9/450 2026-03-23 19:53 by pswait
[考研] 323求调剂 +6 洼小桶 2026-03-18 6/300 2026-03-23 00:29 by king123!
[考研] 一志愿东华大学化学070300,求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 289材料与化工(085600)B区求调剂 +3 这么名字咋样 2026-03-22 4/200 2026-03-22 17:56 by 云民大李老师
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考研] 一志愿深大,0703化学,总分302,求调剂 +4 七月-七七 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:20 by 学员8dgXkO
[基金申请] 学校已经提交到NSFC,还能修改吗? 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +4 ydfyh 2026-03-17 4/200 2026-03-21 02:20 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
[考研] 353求调剂 +3 拉钩不许变 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:56 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见