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冬恋

金虫 (小有名气)

[交流] 液相C18柱活化后检测物质浓度过低 已有4人参与

Waters  C18柱
活化方式:100%甲醇,0.4ml/min,过夜
          85%甲醇,0.4ml/min,1h
                  50%甲醇,1ml/min,1h
                  85%流动相,1ml/min,1h
检测时柱压稳定,正常范围内,柱效高,但检测物质浓度却很低,约为实际浓度的1/3,且浓度波动较大。
询问是什么原因导致的?下一步如何处理呢?急需用液相,万分感谢大家!!!
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zhaolianhai

木虫 (正式写手)


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xbqewpq: 应助指数+1, 感谢交流~~ 2012-08-24 07:52:50
确定是柱子的问题而不是检测波长不对?确定进样量也没问题?
如果柱子柱效降低,虽然峰面积不会差太多,但色谱峰峰高会变的很低,半峰宽变的很大,这可能是一个导致灵敏度变低的原因。没什么办法,实在不行,买点填料重新填充下色谱柱吧,祝顺利解决问题,好运。
2楼2012-08-24 07:17:54
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冬恋

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaolianhai at 2012-08-24 07:17:54
确定是柱子的问题而不是检测波长不对?确定进样量也没问题?
如果柱子柱效降低,虽然峰面积不会差太多,但色谱峰峰高会变的很低,半峰宽变的很大,这可能是一个导致灵敏度变低的原因。没什么办法,实在不行,买点填 ...

检测波长及进样量是固定好的
之前配的标准品经过检测,峰形挺好,峰面积也是蛮高的。
后来重新配的新的标准品,检测后峰面积就很低了(配了2次,以区别是否是配制出现问题)
都是一个瓶子的固体样品,没理由差那么大,而且之前的样品放置很久了。
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3楼2012-08-24 11:01:46
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jyp2002

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
个人觉得楼主的活化经过对色谱柱没有影响,造成浓度波动范围很大的原因应该不是由于色谱柱活化造成的。
4楼2012-08-24 15:42:11
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xguangli0304

铜虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助~欢迎常来分析版 2012-08-26 19:58:01
也许你的柱子到寿命了吧,或者换该柱子以前检测过的样品,重新进样,看能否重复以前的结果;换同型号,同厂家的柱子再试试。
沉下来,静下来,才能爬起来!
5楼2012-08-25 14:13:01
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冬恋

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xguangli0304 at 2012-08-25 14:13:01
也许你的柱子到寿命了吧,或者换该柱子以前检测过的样品,重新进样,看能否重复以前的结果;换同型号,同厂家的柱子再试试。

。。。。。。
新柱子好不好,活化准备用呢!
新旧柱子检测同一个样品峰面积差距很大,6倍左右。
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6楼2012-08-26 15:39:29
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chic

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助~欢迎常来分析版 2012-08-26 19:57:50
柱子的活化过程缺少纯水相这一步,但理应不致响应值差异骤降。听你说新旧柱子峰面积差6倍,又似乎与柱子的性能有关,所以用以下方法活化柱子。
5ml/min 100% MeOH purge
100% MeOH 1ml/Min 20min
50% MeOH 1ml/Min 20min
100% H2O 1ml/Min 10min
50% MeOH 1ml/Min 20min
你的流动相1ml/Min 10min,再进样
7楼2012-08-26 17:35:04
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