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wangxiao9253

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[求助] 转化大肠杆菌后，涂板为什么都是模糊不清的菌？

在三四个月前，用的takara的大肠杆菌感受态做转化，涂板后生长比较模糊，只有周围几个点是单克隆，后来觉得是amp的质量，就新买了amp，涂板后得到了单克隆，而且清楚。takara的感受态用完后就换了个小牌子的感受态，涂板后就生长比较模糊了，但是蓝白斑筛选大体还是有区别的，模糊的地方有的是蓝色的，所谓的模糊就像是玻璃有泥，用脏布擦了擦，那种感觉。开始以为这种小牌的感受态浓度太大了，稀释后涂板，结果和不稀释差不多。请问，这种生长模糊，基本没有单克隆菌落是什么原因?是感受态的问题还是amp的问题，还是我实验操作的问题？

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1楼2012-08-23 14:56:32

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wangxiao9253

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引用回帖:

4楼: Originally posted by starseacow at 2012-08-23 21:44:19
楼主所说的情况我也遇到过，我用的是TOP10，可能的原因是AMP失效或浓度不够，培养时间可能过长，涂板时太湿。现在我采取的方案是配好AMP板子后基本两星期用掉，接菌涂板前在超净台吹一会，让板子干一点，同时培养时 ...

我是在涂板前晾干的，涂板时一点都不湿，涂上去就干了，以前用takara感受态时候浓度也是这样的，不知道是不是amp失效了，自己觉得应该不会失效的，刚配的啊，amp也是今年刚买的。培养时间差不多也是14小时，我再试试吧