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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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刁寒冰

银虫 (小有名气)

[求助] 质粒提取

有用过天根小题中量质粒试剂盒的虫友没?之前说是可以提取质粒的浓度和质量比较好的,可是我提了2次,浓度都很低,而且A260/A280的比值都不对呢?不知是怎样弄啊?
之前也查过一些资料,说是注意细节之类的,我做的时候也很注意了,怎么还是不行啊?我用的菌是里氏杆菌

[ Last edited by 1949stone on 2012-8-22 at 07:23 ]
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huangguoqing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by huangguoqing at 2012-08-22 10:43:26
建议先确认一下菌里面是不是真的有质粒,可以做一下菌落PCR试试;或者你提取的是不是质粒,可能是基因组的降解物;我之前有过一次悲剧的结果,后来证实是10Xloading buffer的问题。

电泳鉴定的时候你是用核酸蛋白分析仪测的还是琼脂糖电泳?还有我想问一下,你的质粒有多大?
10楼2012-08-22 15:56:48
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hutingting

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我们用过,不过是提的大肠杆菌,每次结果都还不错,过夜培养的菌液,按照说明书一步一步来,没什么问题
2楼2012-08-22 08:54:40
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-22 15:19:50
我也用过呢,提的是大肠的。效果还挺好的呢。不过没有测过吸光度。直接就用了。比较关键的事加入溶液3后西区上清液不要吸入沉淀。
3楼2012-08-22 09:34:36
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huangguoqing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-22 15:19:58
建议先确认一下菌里面是不是真的有质粒,可以做一下菌落PCR试试;或者你提取的是不是质粒,可能是基因组的降解物;我之前有过一次悲剧的结果,后来证实是10Xloading buffer的问题。
4楼2012-08-22 10:43:26
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