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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 做生物样品的色谱柱压力很高怎么办？
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little-ant

新虫 (小有名气)

[求助] 做生物样品的色谱柱压力很高怎么办？

如题，本人做单体化合物的体内分析，安捷伦C18的反相柱，最近做组织分布，一段时间后发现柱压很高。纯甲醇1mL/min时压力都145bar,53%的甲醇水溶液冲时压力达到250bar，压力太高有时导致仪器都自动停泵了，基本排除预柱和系统管路问题，请问该用什么办法能够使压力恢复正常呢？
PS.本人做组织时是用生理盐水来匀浆组织的，流动相只有甲醇水，会不会柱子里也有盐析出来？
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1楼 2012-08-20 10:41:09
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little-ant

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by mc0326 at 2012-08-20 14:27:26
还有你的组织样品是怎么处理的呢？是直接沉淀蛋白吗？如果是沉淀倍数要大一些，最好大于6倍体积，要是液液萃取会好一些

我是用的3倍体积的甲醇沉淀的,我另一个同学也是这么做的,但是他的柱子好像都没有出现这个情况,我也觉得可能是盐析,但是我用95%水冲很久了,效果并不好,也不敢反冲,好多贴都说反冲后柱子就更不经用了,很是着急啊,不过还是谢谢你的建议
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4楼2012-08-24 19:31:13
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mc0326

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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little-ant: 金币+3 2012-08-24 19:31:25
有可能会有盐析出的，不要用纯甲醇冲，有95%的水冲，先卸下柱子将管路里的盐冲干净，再接上柱子冲，实在不行可以试一下反冲
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2楼2012-08-20 14:25:17
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mc0326

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

还有你的组织样品是怎么处理的呢？是直接沉淀蛋白吗？如果是沉淀倍数要大一些，最好大于6倍体积，要是液液萃取会好一些
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3楼2012-08-20 14:27:26
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