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做大肠杆菌,red同源重组 基因敲入的来探讨!
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yxj1987
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做大肠杆菌,red同源重组 基因敲入的来探讨!
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做的red同源重组把外源基因整合到大肠染色体上,得到阳性克隆(pcr鉴定)但是page时蛋白不表达,weston时单抗检测也检测不出来,为什么
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1楼
2012-08-17 21:10:37
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huiee
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2012-08-18 15:16:56
可能假阳性啊 把PCR产物去测个序
不知道你具体是这么选择的,有没有抗性基因啊
不如先做个southblot
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2楼
2012-08-18 04:16:55
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yxj1987
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专业: 基因表达调控与表观遗传学
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2楼
:
Originally posted by
huiee
at 2012-08-18 04:16:55
可能假阳性啊 把PCR产物去测个序
不知道你具体是这么选择的,有没有抗性基因啊
不如先做个southblot
先抗性检测,cm+抗性,然后挑取单菌落点板,长出来后做的菌落pcr检测,pcr鉴定为敲入成功(做了阴性对照),然后才把菌接入lb中摇起来,然后做的page,和weston blot,都没有表达,求助
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3楼
2012-08-18 16:36:30
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