应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » PCR验证
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
81/1返回列表
查看: 1656  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

KO奋斗

金虫 (正式写手)

[求助] PCR验证

从原始菌中提取一NA基因，重组到大肠杆菌BL21，产生的酶有活性，但是分子量（110Kb)与原始菌(67Kb)的不同，根据重组菌的目的序列设计引物去PCR原始菌，没有条带。现不知道该从哪里下手解决这个问题。希望大家给于帮助啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2012-08-16 17:07:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

674515734

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流！ 2012-08-16 20:16:36
KO奋斗: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-08-17 08:42:40
你的基因片段是不是插入到大肠杆菌某个基因内部了，导致形成了了一个融合蛋白。
赞一下 回复此楼
在卑微中活出精彩，在短暂中寻求永恒。。。
2楼2012-08-16 17:49:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

KO奋斗

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 674515734 at 2012-08-16 17:49:24
你的基因片段是不是插入到大肠杆菌某个基因内部了，导致形成了了一个融合蛋白。

谢谢，应该不是啊，是质粒上，没活性还很高，就是分子量不统一啊
赞一下 回复此楼
3楼2012-08-16 18:47:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

woshizhufeng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
重新设计一下引物试试吧，多做几次
赞一下 回复此楼
4楼2012-08-17 00:04:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果表达的蛋白分子量不对，并且你的引物还扩不出来，那说明你连接的片段不是你的基因。再重复连接一次，如果还是出现这个结果，并且如果楼主确定你的连接片段是你的基因的话，楼主可以把这个蛋白测个序，比对下看到底是什么地方出的问题，是否真的像一楼说的那样融合蛋白，个人觉得不可能，如果是真的，那真是个新现象哈，
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

KO奋斗
5楼2012-08-17 07:37:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

KO奋斗

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by woshizhufeng at 2012-08-17 00:04:05
重新设计一下引物试试吧，多做几次

我试了好几个引物了啊，谢谢
赞一下 回复此楼
6楼2012-08-17 08:39:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

KO奋斗

金虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by chenguestc at 2012-08-17 07:37:01
如果表达的蛋白分子量不对，并且你的引物还扩不出来，那说明你连接的片段不是你的基因。再重复连接一次，如果还是出现这个结果，并且如果楼主确定你的连接片段是你的基因的话，楼主可以把这个蛋白测个序，比对下看到 ...

谢谢，只能先试试看了啊
赞一下 回复此楼
7楼2012-08-17 08:42:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aofeng860308

木虫 (正式写手)
1、首先确定下你用的什么质粒，会不会质粒上有融合蛋白。
2、对重组质粒进行测序，进行比对，看有何异同。
赞一下 回复此楼
8楼2012-08-18 19:29:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 KO奋斗 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料专硕 调剂 +12 CXN123456 2026-04-03 12/600 2026-04-04 20:47 by imissbao
[考研] 302求调剂一志愿华中师范大学 +8 小江小江江江 2026-04-02 8/400 2026-04-04 19:50 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿沪9，求生物学调剂，326分 +6 刘墨墨 2026-04-04 6/300 2026-04-04 19:44 by 唐沐儿
[考研] 求调剂 +6 朔朔话 2026-04-02 7/350 2026-04-04 19:16 by 蓝云思雨
[考研] 11408 一志愿西电，277分求调剂 +4 zhouzhen654 2026-04-03 4/200 2026-04-04 18:10 by 猪会飞
[考研] 271分求调剂学校 +11 zph158488！ 2026-04-02 11/550 2026-04-04 01:06 by userper
[考研] 调剂0855-288 +5 x熊二a 2026-04-03 5/250 2026-04-04 00:19 by 猪会飞
[考研] 兽医调剂 +3 wh119216 2026-04-02 3/150 2026-04-03 19:34 by zrongyan
[考研] 301求调剂 +14 A_JiXing 2026-04-01 14/700 2026-04-03 18:31 by ls刘帅
[考研] 334求调剂 +9 Trying] 2026-03-31 9/450 2026-04-03 15:18 by 琢珥丶
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +6 崔wj 2026-04-02 6/300 2026-04-03 10:19 by 蓝云思雨
[考研] 初试301，代码085701环境工程，本硕一致，四六级已过，有二区一作，共发表5篇论文 +6 axibli 2026-04-01 6/300 2026-04-02 13:42 by Ecowxq666！
[考研] 314求调剂 +11 1xiaojun23 2026-03-31 12/600 2026-04-02 12:31 by 1xiaojun23
[考研] 348环境工程调剂 +3 吴彦祖24k 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:14 by nanaliuyun
[考研] 一志愿北交大材料工程，总分358 +4 cs0106 2026-04-01 4/200 2026-04-02 07:42 by 尚水阁主
[考研] 291求调剂 +20 Y-cap 2026-03-29 25/1250 2026-04-01 23:49 by 欣喜777
[考研] 求调剂 +4 DADA怪 2026-03-31 4/200 2026-04-01 14:30 by ZXlzxl0425
[考研] 335求调剂 +3 321* 2026-03-31 4/200 2026-04-01 00:00 by 321*
[考研] 070300化学专业279调剂 +10 哈哈哈^_^ 2026-03-31 10/500 2026-03-31 23:13 by liu823948201
[考研] 本科211安全工程，初试290分，求调剂 +3 2719846834 2026-03-28 3/150 2026-03-31 13:52 by 热情沙漠
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭