应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » PCR验证
81/1返回列表
查看: 2062  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

KO奋斗

金虫 (正式写手)

[求助] PCR验证

从原始菌中提取一NA基因，重组到大肠杆菌BL21，产生的酶有活性，但是分子量（110Kb)与原始菌(67Kb)的不同，根据重组菌的目的序列设计引物去PCR原始菌，没有条带。现不知道该从哪里下手解决这个问题。希望大家给于帮助啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2012-08-16 17:07:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

674515734

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流！ 2012-08-16 20:16:36
KO奋斗: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-08-17 08:42:40
你的基因片段是不是插入到大肠杆菌某个基因内部了，导致形成了了一个融合蛋白。
赞一下 回复此楼
在卑微中活出精彩，在短暂中寻求永恒。。。
2楼2012-08-16 17:49:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

KO奋斗

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 674515734 at 2012-08-16 17:49:24
你的基因片段是不是插入到大肠杆菌某个基因内部了，导致形成了了一个融合蛋白。

谢谢，应该不是啊，是质粒上，没活性还很高，就是分子量不统一啊
赞一下 回复此楼
3楼2012-08-16 18:47:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

woshizhufeng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
重新设计一下引物试试吧，多做几次
赞一下 回复此楼
4楼2012-08-17 00:04:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果表达的蛋白分子量不对，并且你的引物还扩不出来，那说明你连接的片段不是你的基因。再重复连接一次，如果还是出现这个结果，并且如果楼主确定你的连接片段是你的基因的话，楼主可以把这个蛋白测个序，比对下看到底是什么地方出的问题，是否真的像一楼说的那样融合蛋白，个人觉得不可能，如果是真的，那真是个新现象哈，
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

KO奋斗
5楼2012-08-17 07:37:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

KO奋斗

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by woshizhufeng at 2012-08-17 00:04:05
重新设计一下引物试试吧，多做几次

我试了好几个引物了啊，谢谢
赞一下 回复此楼
6楼2012-08-17 08:39:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

KO奋斗

金虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by chenguestc at 2012-08-17 07:37:01
如果表达的蛋白分子量不对，并且你的引物还扩不出来，那说明你连接的片段不是你的基因。再重复连接一次，如果还是出现这个结果，并且如果楼主确定你的连接片段是你的基因的话，楼主可以把这个蛋白测个序，比对下看到 ...

谢谢，只能先试试看了啊
赞一下 回复此楼
7楼2012-08-17 08:42:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aofeng860308

木虫 (正式写手)
1、首先确定下你用的什么质粒，会不会质粒上有融合蛋白。
2、对重组质粒进行测序，进行比对，看有何异同。
赞一下 回复此楼
8楼2012-08-18 19:29:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 KO奋斗 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 6/300 2026-11-01 14:42 by BCdvBAEpt3zm
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 13/650 2026-11-01 14:37 by BCdvBAEpt3zm
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 13/650 2026-11-01 14:16 by BCdvBAEpt3zm
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 3/150 2026-11-01 12:53 by BCdvBAEpt3zm
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 7/350 2026-11-01 12:40 by BCdvBAEpt3zm
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 6/300 2026-11-01 12:40 by BCdvBAEpt3zm
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 8/400 2026-11-01 12:38 by BCdvBAEpt3zm
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 10/500 2026-11-01 12:27 by BCdvBAEpt3zm
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 7/350 2026-11-01 12:27 by BCdvBAEpt3zm
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 11/550 2026-11-01 12:24 by BCdvBAEpt3zm
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 17/850 2026-11-01 12:24 by BCdvBAEpt3zm
[论文投稿] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 12/600 2026-11-01 12:19 by BCdvBAEpt3zm
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 16/800 2026-11-01 12:14 by BCdvBAEpt3zm
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 18/900 2026-11-01 12:11 by BCdvBAEpt3zm
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 4/200 2026-11-01 11:01 by BCdvBAEpt3zm
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 14/700 2026-11-01 10:43 by BCdvBAEpt3zm
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 16/800 2026-11-01 10:27 by BCdvBAEpt3zm
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 26/1300 2026-11-01 10:22 by BCdvBAEpt3zm
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 14/700 2026-11-01 07:01 by YXM1FDCSE8Bn
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 15/750 2026-11-01 05:22 by YXM1FDCSE8Bn
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭