24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 944  |  回复: 13

761429495

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白纯化

求助:木聚糖酶已经在毕赤酵母中表达了,接下来想做酶蛋白纯化,我打算通过PCR重新构建质粒给目的基因加上组氨酸标签,应该以ppic-9k全长基因为模版还是一个片段为模版呢,初学者求指导,谢谢啊:t
回复此楼

» 猜你喜欢

每一个让你讨厌的现在,都有一个不努力的曾经。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

哈哈大姑爷

至尊木虫 (知名作家)

感谢参与,应助指数 +1
scelab: 应助指数-1, 酱油的 2012-08-17 12:14:35
路过,看看有没有酱油
GO ON
2楼2012-08-16 22:55:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

761429495

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 哈哈大姑爷 at 2012-08-16 22:55:19
路过,看看有没有酱油

有没有建设性的意见啊
每一个让你讨厌的现在,都有一个不努力的曾经。
3楼2012-08-17 13:37:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chlorella409

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你可以在目的基因的一端引物中加上His的编码,重新PCR后和载体片段连接

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2012-08-17 16:03:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

哈哈大姑爷

至尊木虫 (知名作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 761429495 at 2012-08-17 13:37:44
有没有建设性的意见啊...

刚开始做,经验不足,希望以后能够多多交流
GO ON
5楼2012-08-18 16:46:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xbl3688

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
ppic-9k应该是酵母的内源质粒吧,像四楼说的,你扩增的时候在上游引物里加上组氨酸标签的序列,克隆出基因后双酶切,连接到这个质粒上就可以了啊。你扩这个质粒上的基因或是片段干嘛呢

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

生活的乐趣在于善于发现美,学会欣赏美
6楼2012-08-18 19:01:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

761429495

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by chlorella409 at 2012-08-17 16:03:09
你可以在目的基因的一端引物中加上His的编码,重新PCR后和载体片段连接

O(∩_∩)O谢谢了啊,受教受教
每一个让你讨厌的现在,都有一个不努力的曾经。
7楼2012-08-19 19:56:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

761429495

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by chlorella409 at 2012-08-17 16:03:09
你可以在目的基因的一端引物中加上His的编码,重新PCR后和载体片段连接

谢谢了啊,受教受教。。。
每一个让你讨厌的现在,都有一个不努力的曾经。
8楼2012-08-19 20:00:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

761429495

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by xbl3688 at 2012-08-18 19:01:31
ppic-9k应该是酵母的内源质粒吧,像四楼说的,你扩增的时候在上游引物里加上组氨酸标签的序列,克隆出基因后双酶切,连接到这个质粒上就可以了啊。你扩这个质粒上的基因或是片段干嘛呢

谢谢了啊,受教受教。。。
每一个让你讨厌的现在,都有一个不努力的曾经。
9楼2012-08-19 20:02:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yandz680717

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

注意His tag加在N端可能对酶的活性有影响,看看文献
10楼2012-08-20 05:55:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 761429495 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +15 张zic 2026-04-05 16/800 2026-04-10 08:12 by kangsm
[考研] 一志愿中南大学物理学,英一66,求调剂 +3 长烟旖旎 2026-04-08 4/200 2026-04-09 21:27 by wutongshun
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +9 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-09 10/500 2026-04-09 20:01 by Orcid
[考研] 296求调剂 +3 汪!?! 2026-04-08 3/150 2026-04-08 22:00 by zhouyuwinner
[考研] 化工学硕 285求调剂 +26 Wisjxn 2026-04-07 26/1300 2026-04-08 14:42 by screening
[考研] 280求调剂 +9 李rien 2026-04-04 9/450 2026-04-08 13:20 by lijunpoly
[考研] 265求调剂 +19 小木虫085600 2026-04-06 21/1050 2026-04-08 10:38 by 逆水乘风
[考研] 313求调剂 +3 十六拾陆 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:20 by lbsjt
[考研] 081700化学工程与技术 一志愿中海洋 323 求调剂学校 +19 披星河 2026-04-03 19/950 2026-04-07 15:14 by 尽舜尧1
[考研] 328求调剂 +4 ghhh88888 2026-04-06 5/250 2026-04-07 14:45 by ghhh88888
[考研] 0854求调剂 +9 亨氏番茄沙司 2026-04-06 10/500 2026-04-07 14:37 by shdgaomin
[考研] 考研调剂 +3 Wwwwwww哇 2026-04-06 3/150 2026-04-06 20:55 by lbsjt
[考研] 调剂 一志愿吉林大学357分 +5 .Starry. 2026-04-04 5/250 2026-04-06 09:28 by cql1109
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358求调剂 +6 cs0106 2026-04-05 6/300 2026-04-05 16:34 by imissbao
[考研] 工科求调剂 +15 11ggg 2026-04-03 15/750 2026-04-05 16:24 by zzx2138
[考研] 290求调剂 +7 luoziheng 2026-04-04 7/350 2026-04-04 23:17 by lqwchd
[考研] 能动调剂326专硕 +4 wan112233 2026-04-04 4/200 2026-04-04 22:47 by yu221
[考研] 一志愿华北电力大学(北京),材料科学与工程学硕265,求调剂 +11 yelck 2026-04-03 12/600 2026-04-04 19:52 by dongzh2009
[考研] 化工求调剂 +11 荔香芝士椰奶 2026-04-03 11/550 2026-04-03 22:06 by 啵啵啵0119
[考研] 335求调剂 +7 沈清璃 2026-04-03 7/350 2026-04-03 18:55 by lijunpoly
信息提示
请填处理意见