| 查看: 1802 | 回复: 5 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
loop00木虫 (小有名气)
阿凡达
|
[求助]
ELISA 显色液空白OD偏高，P/N偏小，是否可以每孔OD减去显色液对照的值?
|
|
|
间接ELISA做了棋盘法筛选条件，最佳抗原和一抗浓度下阳性血清值1.0，阴性血清值0.14。我用的TMB显色，双波长测定，空气空白OD均值0.02。空气空白孔不加抗原、抗体，只加TMB显色液，TMB OD均值0.12。 目前我的最佳P/N值在6.0，我认为偏低，隔壁师兄其他实验阳性1.0，阴性都在0.1以下，P/N约12。我认为我的实验结果表明封闭、抗体浓度、洗涤问题都不大，关键是TMB质量有问题，TMB显色液空白本底过高，影响我的P/N. 问题：我的TMB空白OD值正常吗？各位有经验的前辈TMB空白多少？ 我可以用我的阴阳性血清OD扣除TMB空白OD再分析实验结果吗？ 怎样才能减小TMB空白的值？避光？重配？买现成的TMB？ 另：比最佳浓度更高的抗原稀释度上，阳性血清OD2.6，阴性0.65，是否是显色时间太长，我应该在做Chessboard棋盘的时候把这一排抗原浓度提前终止？（不同浓度使用不同TMB显色时间）如果看到抗原梯度上阳性孔的值都在1.0左右，论文审稿人会有什么意见呢？ 另：如有详尽专业的解释，大家都好评的，另赠5金币，写技术贴不容易  [ Last edited by wizardfan on 2012-8-24 at 05:36 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
北京211副教授，35岁，想重新出发，去国外做博后，怎么样？
已经有3人回复
-
自荐读博
已经有3人回复
-
求助:我三月中下旬出站，青基依托单位怎么办？
已经有5人回复
-
论文终于录用啦！满足毕业条件了
已经有22人回复
-
不自信的我
已经有5人回复
-
磺酰氟产物，毕不了业了！
已经有4人回复
-
投稿Elsevier的杂志（返修），总是在选择OA和subscription界面被踢皮球
已经有8人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 为什么要用OD600来测细菌/真菌浓度？
已经有16人回复
- 合成引物序列时的OD啥意思？一般填多少？
已经有10人回复
- 酵母的菌体量为5*10^6--10^7时的OD600约为多少
已经有8人回复
- 芽孢杆菌OD值与活菌数相对应的标准曲线
已经有9人回复
- 细菌OD值的测定
已经有7人回复
- ELISA TMB显色液怎么配制？我配的怎么一混合就浑浊了？
已经有13人回复
- ELISA抗体检测的显色剂和终止液的问题
已经有4人回复
- 【求助/交流】关于测定大肠杆菌群密度度的 OD600 的问题
已经有15人回复
- 【求助/交流】RNA质量检测OD值的意义？
已经有6人回复
- 【求助/交流】微生物培养过程中的OD值
已经有8人回复
loop00
木虫 (小有名气)
阿凡达
- BioEPI: 1
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 1553.3
- 散金: 15
- 红花: 2
- 帖子: 299
- 在线: 109.9小时
- 虫号: 466614
- 注册: 2007-11-24
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
2楼2012-08-16 13:41:04
loop00
木虫 (小有名气)
阿凡达
- BioEPI: 1
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 1553.3
- 散金: 15
- 红花: 2
- 帖子: 299
- 在线: 109.9小时
- 虫号: 466614
- 注册: 2007-11-24
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
6楼2012-08-23 18:34:02