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dingyonghui铜虫 (小有名气)
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[真诚求助] 免疫荧光染内皮细胞的Vinculin方法 (Focal Adhesion component)
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RT, 本人初次做细胞实验，Ti经过改性的sample，进行内皮细胞培养后，想通过染色看细胞在样品表面粘附的情况，染Vinculin看Focal Adhesion 的分布，买了一抗是Anti-Vinculin antibody (Mouse monoclonal); 二抗是Goat polyclonal Secondary Antibody to Mouse IgG-H&L(FITC); 问题如下： （1）染Vinculin用不用Triton X-100 破膜？判断标准是什么？ （2）一抗和二抗分别用什么来稀释啊？网上查了很多，有说用blocking solution （1%BSA/PBS），有的说直接PBS，有的说一抗和二抗不一样, 非常的困惑，恳求高手指点啊！！！ |
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