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关于体外转录合成探针电泳检测问题 已有1人参与
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| 小弟最近在做斑马鱼整体胚胎原位杂交,但是在做DIG探针那步遇到问题了,用的是pGM-T质粒模板体外转录的,质粒经过单酶切后是经过回收纯化的,我的探针片段在201nt(是根据插入片段加上多余的载体序列计算的),但是用非变性胶鉴定探针的时候,发现探针长度在400-500bp对应于DNA Marker来说的,有点不解,按道理来说RNA应该比DNA双链跑得快呢,这是为什么呢,特想各位高手求救,问题到底是出现在哪里呢?用的是Roche的体外转录试剂盒DIG RNA Labelling Kit(SP6/T7),谢谢 各位 |
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