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鱼卡潘

铜虫 (初入文坛)

[求助] 酶切位点不同,构建载体

最近构建一个载体,由于载体和片段酶切位点不同,对载体和片段进行了平末端处理,然后进行平末端连接,始终连接不上,请问大家有什么建议,对于构建酶切位点不同的载体?不甚感激!
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鱼卡潘

铜虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by mydoves at 2012-08-05 15:49:06
可以把片段里与载体相同的酶切位点突变掉,再连接比较好。

你能解释的更清楚一些吗?怎么去突变,不甚感谢
5楼2012-08-05 19:03:58
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酶切专家

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-05 22:05:51
你的实验中是双酶切还是单酶切?
如果你能给出更详细的信息(比如酶切位点等),大家可能更容易给你一些建议。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2012-08-04 22:15:59
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mydoves

木虫 (小有名气)

可以把片段里与载体相同的酶切位点突变掉,再连接比较好。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2012-08-05 15:49:06
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鱼卡潘

铜虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 酶切专家 at 2012-08-04 22:15:59
你的实验中是双酶切还是单酶切?
如果你能给出更详细的信息(比如酶切位点等),大家可能更容易给你一些建议。

其中载体是per8,单酶切(xholⅠ),片端是双酶切(xbalⅠ, kpnⅠ)
4楼2012-08-05 19:01:32
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