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451839845

新虫 (初入文坛)

[求助] SOD测定样品的吸光度比对照的还要大？？？？？？

请问大家有没有做过SOD测定，在用NBT法测SOD，光照后溶液有蓝色沉淀，测定的数据很不稳定。后来我有减少了光照时间，从原来的20分钟降到了6分钟，酶液的体积只有0.05ml，现在测的值也是在减，还有就是测定样品的吸光度比对照的还要大，计算后就是负数了，请指点啊
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1楼 2012-08-03 11:33:41
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451839845

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 王静8876 at 2012-08-04 10:14:08
SOD活性很容易就失活了，不知道你测的样品是什么，我以前做过的血液中SOD必须时间不能放的太久，不然很容易就出现负值了。你用的是微量酶标仪测定的呢，还是普通的光度计？个人经验做SOD一定要快，而且很多试剂是必 ...

我做的是植物的样品，测定就是刚拿出来就测的，样品液也是刚提取的
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3楼2012-08-04 18:02:23
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王静8876

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyfgood: 金币+2, 感谢参与！ 2012-08-07 21:21:23
SOD活性很容易就失活了，不知道你测的样品是什么，我以前做过的血液中SOD必须时间不能放的太久，不然很容易就出现负值了。你用的是微量酶标仪测定的呢，还是普通的光度计？个人经验做SOD一定要快，而且很多试剂是必须避光的
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451839845
生活为努力的人而精彩
2楼2012-08-04 10:14:08
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nmgwhzl

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
451839845: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-08-06 17:12:17
应该是核黄素没有溶解。溶解核黄素时是先用碱溶，之后再加水。溶解之后应该是黄色透明的液体。核黄素只用水是很难溶解的。没有溶解的核黄素是呈黄色的颗粒悬浮在液体中。光照时，就会变成蓝色的颗粒，也就是你说的沉淀。
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4楼2012-08-06 16:26:31
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mao19881205

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyfgood: 金币+2, 应助指数+1, 感谢参与 2012-08-07 21:22:01
SOD加试剂过程中都必须在黑暗的条件下进行，而且核黄素之前必须是遮光的，不然会失效。还有光照的强度要合适，你事先测一下光强。
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5楼2012-08-06 17:08:26
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