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123n

木虫 (正式写手)

[求助] IPTG 浓度梯度试验

IPTG 浓度梯度试验,具体怎么做的?
诱导后咋么收集菌??  离心后用PBS溶??煮沸???
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 鼓励积极应助,解答问题 2012-08-02 13:31:33
你可以同时养4瓶,分别是加1mM IPTG,0.1mM IPTG,0.01mM IPTG,0.001mM IPTG,这些梯度基本就能满足了。
收菌就分别用四个瓶子收呗。
既然你是实验设计,基本用什么缓冲液就无所谓了,你只是想看表达情况还有可溶性。
表达情况,就跑诱前诱后胶,比较目的蛋白位置的表达量,当然上样量得一致。
可溶性情况,就等破碎后跑一个上清,沉淀,还有总蛋白量的胶就一目了然了。
2楼2012-08-02 11:16:48
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