应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA提取的新手~~~~求助各位高手
161/2返回列表12下一页
查看: 1530  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

guyue900905

新虫 (初入文坛)

[求助] RNA提取的新手~~~~求助各位高手

我是提取RNA的新手，想请教一下研钵在用之前该怎么处理比较好？为什么我包着锡纸180度三小时烘完，研钵的杵头都黑了，一磨研钵里都是脏东西，请问是因为锡纸没有包好还是别的原因？该怎么处理啊？
  另外。我还想求教一下，用来跑电泳的槽子，梳子什么的该怎么处理啊？
  还得再请教一下，实验中的氯仿，异丙醇，酒精以及plus，用不用分装开啊？如果用的话该怎么分装啊？
  谢谢啦，我的实验老是不成功，而且260/230还特别低，郁闷啊，我都做了快一个月了。谢谢啦！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-08-01 11:33:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

julin1002

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+4, 鼓励发帖交流问题。 2012-08-01 20:56:09
amisking: 回帖置顶 2012-08-01 20:56:11
guyue900905: 金币+2, ★有帮助 2012-08-02 16:14:15
首先是研钵的问题，用过以后要先用水清洗干净，后用depc水浸泡过夜，在高温灭菌半个小（也可以用酒精烧）
其次，在提取过程中，1.在研钵内研磨时，一定要在液氮下，否则样品会降解2.在萃取时，用的枪头盒EP管，都浸泡depc水过夜，且高温灭菌的
最后，试剂，苯酚氯仿异戊醇：25:24:1，是要装在一个棕深色瓶内，混匀再用
最后，切忌操作要快，因为RNA极容易降解，且尽量在低温下操作
祝你成功
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2012-08-01 14:38:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

xw19880905

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-08-02 15:41:07
我一般是研钵一般用蒸馏水洗后，在用无水乙醇清洗，倒去酒精点燃，然后液氮冷却，基本都成功。给你提rna几个建议：1 液氮研磨要充分；2 整个过程要无污染，手套口罩必须之外还得注意枪头，离心管的无菌，建议用进口的，也不需要自己灭菌； 3 跑电泳时要与跑dna的分开，单独使用电泳槽
赞一下(3人) 回复此楼
5楼2012-08-01 15:31:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-01 14:06:42
研钵我都没处理，直接先用液氮冷却，没太大关系的，你要真想高温处理的话，也应该把它洗干净，黑色的东西肯定是没洗干净；有机溶剂可以分开装，其他跑胶用的器具可以不处理
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-08-01 12:38:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-01 14:06:51
提RNA最重要的是最后几步，尤其是溶解RNA的管子一定要用DEPC水处理。前面的步骤可以稍微粗放点，第一步我都是用未处理的EP管，先加入TRIZOL，然后把样品加入，RNA在TRIZOL里是稳定的。
赞一下 回复此楼
3楼2012-08-01 13:09:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guyue900905

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by julin1002 at 2012-08-01 14:38:44
首先是研钵的问题，用过以后要先用水清洗干净，后用depc水浸泡过夜，在高温灭菌半个小（也可以用酒精烧）
其次，在提取过程中，1.在研钵内研磨时，一定要在液氮下，否则样品会降解2.在萃取时，用的枪头盒EP管，都浸 ...

你好  谢谢你的建议  但是我在操作的过程中都很按照规定的步骤啊，我先往研钵里倒少许液氮，使其充分冷却，然后从冻存管里取出样品，加液氮研磨，然后加入plus，再到液氮继续磨，待其全部变为粉末状就放置在一边等待期融化，然后用枪头吸入管中。麻烦帮我看一下这样做对么？
太感谢了
赞一下 回复此楼
6楼2012-08-01 20:52:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

julin1002

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by xw19880905 at 2012-08-01 15:31:58
我一般是研钵一般用蒸馏水洗后，在用无水乙醇清洗，倒去酒精点燃，然后液氮冷却，基本都成功。给你提rna几个建议：1 液氮研磨要充分；2 整个过程要无污染，手套口罩必须之外还得注意枪头，离心管的无菌，建议用进口 ...

操作应该是不会有什么问题，有可能是你研磨得不充分，或许是萃取的次数太多
赞一下 回复此楼
7楼2012-08-02 09:00:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xw19880905

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by guyue900905 at 2012-08-01 20:52:31
你好  谢谢你的建议  但是我在操作的过程中都很按照规定的步骤啊，我先往研钵里倒少许液氮，使其充分冷却，然后从冻存管里取出样品，加液氮研磨，然后加入plus，再到液氮继续磨，待其全部变为粉末状就放置在一边等 ...

问题不大，建议融化过程中也轻微的研磨一下，这样有助于融化和混匀
赞一下 回复此楼
8楼2012-08-02 10:00:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guyue900905

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by xw19880905 at 2012-08-02 10:00:28
问题不大，建议融化过程中也轻微的研磨一下，这样有助于融化和混匀...

你好  我想问问我的样品一直冻在负70度，可以么？没在负80
赞一下 回复此楼
9楼2012-08-02 10:10:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xw19880905

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by guyue900905 at 2012-08-02 10:10:35
你好  我想问问我的样品一直冻在负70度，可以么？没在负80...

可以，但是最好冻存时间不要过长
赞一下 回复此楼
10楼2012-08-02 11:45:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 guyue900905 的主题更新
161/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +11 不知道叫什么！ 2026-03-15 13/650 2026-03-16 15:10 by 了了了了。。
[考研] 环境工程调剂 +4 大可digkids 2026-03-16 4/200 2026-03-16 14:00 by laoshidan
[基金申请] 国自科面上基金字体 +5 iwuli 2026-03-12 6/300 2026-03-16 13:13 by Kamiu_MK
[硕博家园] 深圳大学硕士招生（2026秋，传感器方向，仅录取第一志愿） +4 xujiaoszu 2026-03-11 8/400 2026-03-16 09:45 by xujiaoszu
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家，不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 材料工程专硕，一志愿中国矿业大学，总分314，求调剂 +5 无懈可击的巨人 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:37 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +5 邱gl 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:37 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工求调剂一志愿 985 总分 295 +8 dream…… 2026-03-12 8/400 2026-03-13 22:17 by 星空星月
[考研] 一志愿西南交大，材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[考研] 332求调剂 +3 Zz版 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:36 by 18595523086
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 材料专硕350 求调剂 +4 王金科 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:02 by ruiyingmiao
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +8 困于星晨 2026-03-12 10/500 2026-03-13 15:42 by ms629
[考研] 求调剂 资源与环境 285 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:31 by houyaoxu
[考研] 08食品或轻工求调剂，本科发表3篇sci一区top论文，一志愿南师大食品科学与工程 +3 我是一个兵， 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:21 by Yuyi.
[考研] 290求调剂 +3 ADT 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:19 by peike
[考研] 298求调剂 +3 Vv呀！ 2026-03-10 3/150 2026-03-10 22:40 by 剑诗杜康
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭