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jibao

银虫 (初入文坛)

[求助] 盐酸水解胶原蛋白后有黑色物体出现

盐酸水解胶原蛋白后有黑色物体出现,请问有高手知道原因吗,还有有什么办法可以去除?之前的蛋白质是用酸酶复合从鱼鳞粉末提取的。麻烦了!
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jibao

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 垂钓者 at 2012-07-27 08:53:37
不知道您的水解条件,如果是110 度 6M HCl 22 h 的话,蛋白应该是水解完全了;另外,不知道您的蛋白纯化方法,如果只是简单的盐析、离心、透析的话,那么很有可能是胶原蛋白不纯导致的, 你可以试着直接水解鱼鳞粉, ...

谢谢了,我还想问问EDTA对羟脯氨酸比色法的测定有影响吗
3楼2012-07-27 14:52:21
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垂钓者

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不知道您的水解条件,如果是110 度 6M HCl 22 h 的话,蛋白应该是水解完全了;另外,不知道您的蛋白纯化方法,如果只是简单的盐析、离心、透析的话,那么很有可能是胶原蛋白不纯导致的, 你可以试着直接水解鱼鳞粉,也会有黑色物质出现的。
垂钓
2楼2012-07-27 08:53:37
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垂钓者

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-07-30 08:28:21
Woessner JF. 1961. The determination of hydroxyproline in tissue and protein samples containing small proportions of this imino acid. Arch Biochem Biophys 93:440–7. 这是测羟脯氨酸的原始文献,你可以自己研究下,这篇文献比较早,找起来可能会比较麻烦,我以前有,后来弄丢了。
垂钓
4楼2012-07-27 16:35:34
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