| 查看: 2465 | 回复: 18 | |||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
sxxuan金虫 (著名写手)
|
[求助]
小片段双酶切求助，急急急
|
||
|
最近在做小片段载体的构建，目的片段只有60bp左右，已经成功连接到pMD18-T中，需要双酶切后连接到pET28a中，但是怎么切怎么连都是假阳性，怎么办？ 附上双酶切图片，Takara 50bp的marker，感觉小片段好像被切散了，请大家帮忙解决呀，都构建了两个星期了，老大催得紧亚历山大呀！ 双酶切体系 质粒 30ul 酶 各1ul 10*buffer 5ul 100*BSA 0.5ul TE 12.5ul 37℃ 2h 割胶回收的最后一步30ul洗脱，连接 pET28a 1ul 小片段 7ul T4 ligase 1ul buffer 1ul  |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有246人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助：重组质粒酶切问题！请大家帮我解决一下，急！
已经有7人回复
- 【求助/交流】分步酶切 回收 求助
已经有17人回复
- 分步酶切 回收 求助
已经有1人回复
sd3824289
木虫 (正式写手)
- 应助: 47 (小学生)
- 金币: 2304.1
- 散金: 33
- 帖子: 740
- 在线: 105.5小时
- 虫号: 1657712
- 注册: 2012-03-02
- 专业: 生物化学
8楼2012-07-26 08:41:27
dshlove
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 17
- 应助: 237 (大学生)
- 金币: 4764.7
- 散金: 20
- 红花: 10
- 帖子: 852
- 在线: 419.2小时
- 虫号: 1609389
- 注册: 2012-02-10
- 性别: GG
- 专业: 污染控制化学
2楼2012-07-25 16:51:46
sxxuan
金虫 (著名写手)
- MolEPI: 4
- 应助: 107 (高中生)
- 金币: 3442.4
- 散金: 104
- 红花: 17
- 帖子: 1478
- 在线: 266.1小时
- 虫号: 512865
- 注册: 2008-02-27
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
3楼2012-07-25 17:15:02
4楼2012-07-25 18:26:48
