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sxxuan金虫 (著名写手)
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[求助]
小片段双酶切求助，急急急
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最近在做小片段载体的构建，目的片段只有60bp左右，已经成功连接到pMD18-T中，需要双酶切后连接到pET28a中，但是怎么切怎么连都是假阳性，怎么办？ 附上双酶切图片，Takara 50bp的marker，感觉小片段好像被切散了，请大家帮忙解决呀，都构建了两个星期了，老大催得紧亚历山大呀！ 双酶切体系 质粒 30ul 酶 各1ul 10*buffer 5ul 100*BSA 0.5ul TE 12.5ul 37℃ 2h 割胶回收的最后一步30ul洗脱，连接 pET28a 1ul 小片段 7ul T4 ligase 1ul buffer 1ul  |
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