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hiiyoky铜虫 (小有名气)
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RNA怎么结合EB的？已有1人参与
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| 我查了一些资料，发现EB是能和双链DNA结合的，不能和ssDNA结合。但是我就纳闷了，大多数RNA（除了一些病毒的RNA）都是单链的，EB是怎么插入、怎么结合、然后产生发射光谱的呢？我是搞材料的，所以对这些方面感兴趣，求好心人回答 |
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hiiyoky
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【答案】应助回帖
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溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中，大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料分子插入后，其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用。这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近，导致与DNA结合的染料呈现荧光，其荧光产率比游离溶液中染料有所增加。DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料，而被结合的染料本身吸收302nm和366nm的光辐射。大多数对单链DNA或RNA染色的荧光时通过染料结合到分子内形成较短的链内螺旋产生的。EB与DNA结合后随DNA在琼脂糖凝胶移动。至于会不会全部跑出琼脂糖凝胶？通常我们做试验都是跑完电泳后再用泡EB20到30 分钟，如果在跑电泳时于点样孔中加入的话，整个电泳槽中都可能有EB，仪器的清洗就麻烦了。 百度的。  |
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hiiyoky5楼2012-07-24 22:41:23