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铁人小强

木虫 (小有名气)


[交流] 5L反应器发酵接种前一小时,pH飙升了0.6。。。。。。

RT,pH短时间内上升了0.6,接种后,通过流加1M 盐酸逐渐降低pH,待pH降至正常水平时,停止pH的调节,pH恢复自然变化。随后过程中,pH缓慢下降(以葡萄糖为碳源),但DO基本保持不变,取样时发现,发酵液浑浊,我发酵培养的是丝状真菌,镜检发酵液确实存在其他微小的杆状微生物,但搞不懂的是,若是染菌,为什么DO不降呢,难不成是非耗氧菌,有氧环境也不会抑制其生长。

请问作发酵的同行们,有见过类似情况的没?帮忙分析一下吧
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cnlah

木虫 (职业作家)



铁人小强(金币+1): 谢谢参与
pH变化可能是灭菌前后的变化,高温会影响里面的成分。如果丝状真菌中有杆菌,100%染菌,但是要排除一些培养基中的杆状纤维颗粒。染菌一定是好氧菌,因为厌氧菌生长缓慢,无法和好氧菌包括真菌在好氧竞争。DO不变说明菌体呼吸强度变化不大。要么也可能DO坏了,这个仪器太精贵了。葡萄糖为碳源一定是会降pH的,有有机酸生成。但是一般丝状真菌可以适应酸性环境。问题不大。总结你染菌了,pH没有问题。
3楼2012-07-20 07:01:39
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chenweilala

金虫 (小有名气)



铁人小强(金币+1): 谢谢参与
罐子染的杆菌一般来说为大肠杆菌(兼性好氧菌);至于发酵液已变浑浊,而DO值却并未下降,此原因可能是杆菌还未开始大规模繁殖生长,先前培养基中的过多的饱和氧满足它的生长需氧量。
5楼2012-07-20 08:00:27
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铁人小强(金币+1): 谢谢参与
可以是染兼性厌氧菌,开始时菌密度不会太大,DO不一定能看出来。
6楼2012-07-20 08:03:24
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xujb32

银虫 (知名作家)



铁人小强(金币+1): 谢谢参与

你把培养液涂平板看看吧,我见到过真菌变性的。
7楼2012-07-20 08:34:12
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铁人小强

木虫 (小有名气)


引用回帖:
3楼: Originally posted by cnlah at 2012-07-20 07:01:39
pH变化可能是灭菌前后的变化,高温会影响里面的成分。如果丝状真菌中有杆菌,100%染菌,但是要排除一些培养基中的杆状纤维颗粒。染菌一定是好氧菌,因为厌氧菌生长缓慢,无法和好氧菌包括真菌在好氧竞争。DO不变说明 ...

灭菌后接种前的时间长达10个小时,有维持恒定条件,pH只是在接种前1小时上升,所以不可能是是灭菌前后的变化,而且变化也不会有这么大的幅度。培养基比较简单,没有任何纤维颗粒。要是耗氧菌,DO不可能不降。
13楼2012-07-20 09:54:08
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铁人小强

木虫 (小有名气)


引用回帖:
5楼: Originally posted by chenweilala at 2012-07-20 08:00:27
罐子染的杆菌一般来说为大肠杆菌(兼性好氧菌);至于发酵液已变浑浊,而DO值却并未下降,此原因可能是杆菌还未开始大规模繁殖生长,先前培养基中的过多的饱和氧满足它的生长需氧量。

那接种前为什么pH会上升呢?
14楼2012-07-20 09:55:04
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铁人小强

木虫 (小有名气)


引用回帖:
7楼: Originally posted by xujb32 at 2012-07-20 08:34:12

你把培养液涂平板看看吧,我见到过真菌变性的。

我曾经遇到过类似情况,涂板后确实有乳白色杂菌生长
15楼2012-07-20 09:56:03
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chenweilala

金虫 (小有名气)


我现在也是在做5L发酵罐,巧合的是和楼主一样染菌了,而且是杆菌!我每次灭完菌后,接种前,会发现随着温度的降低,空气的通入,pH会有小幅上升的趋势,这个很正常。后来,我又在100L发酵罐上进行试验,得到同样的效果!!
16楼2012-07-20 12:14:29
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铁人小强

木虫 (小有名气)


引用回帖:
16楼: Originally posted by chenweilala at 2012-07-20 12:14:29
我现在也是在做5L发酵罐,巧合的是和楼主一样染菌了,而且是杆菌!我每次灭完菌后,接种前,会发现随着温度的降低,空气的通入,pH会有小幅上升的趋势,这个很正常。后来,我又在100L发酵罐上进行试验,得到同样的效 ...

我的罐不是每次都会pH上升的,温度和空气通入,一般不会影响pH和DO,因为我的通气和温度都是恒定的
17楼2012-07-20 12:38:07
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choly

木虫 (著名写手)



铁人小强(金币+1): 谢谢参与
以后我估计也会做发酵。。所以多看看。。
18楼2012-07-22 12:00:58
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h0per

金虫 (小有名气)



铁人小强(金币+1): 谢谢参与
染大肠的情况不可能,基本上是染芽孢杆菌和球菌。
19楼2012-07-22 21:00:20
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铁人小强

木虫 (小有名气)


引用回帖:
19楼: Originally posted by h0per at 2012-07-22 21:00:20
染大肠的情况不可能,基本上是染芽孢杆菌和球菌。

为什么猜测是芽孢杆菌啊?
22楼2012-07-24 07:58:12
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feiandqiang

银虫 (小有名气)


校正是有区别的,好的校正没问题,校正不好很容易出现你这种情况
24楼2012-07-24 08:52:14
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h0per

金虫 (小有名气)


引用回帖:
22楼: Originally posted by 铁人小强 at 2012-07-24 07:58:12
为什么猜测是芽孢杆菌啊?...

大规模生产的时候,基本上是染芽孢杆菌和球菌。不是猜测,是肯定。
多是通过空气系统或培养基灭菌不彻底导致的。请参照微生物在空气水土壤中的分布去考虑这个问题。 你华理的?校友?
26楼2012-07-24 14:53:29
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铁人小强

木虫 (小有名气)


引用回帖:
26楼: Originally posted by h0per at 2012-07-24 14:53:29
大规模生产的时候,基本上是染芽孢杆菌和球菌。不是猜测,是肯定。
多是通过空气系统或培养基灭菌不彻底导致的。请参照微生物在空气水土壤中的分布去考虑这个问题。 你华理的?校友?...

恩,华理的,一般染菌后,初期都是DO下降,pH也下降,所以对这种pH上升,DO不降的情形还真很少见
27楼2012-07-24 23:05:52
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419400

铁杆木虫 (正式写手)



铁人小强(金币+1): 谢谢参与
感觉与电极漂移有关,这样的问题我见过许多,一般与电极有关。因为我见到过这样的问题,发酵都成功。这只是我个人意见。
28楼2012-07-27 11:51:19
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liurechen

银虫 (小有名气)



铁人小强(金币+1): 谢谢参与
我也做丝状真菌发酵的,由于控制pH比较低所以比较少染细菌,如果染的话一般是杆菌(细长的比较多),同时pH上升。因为发酵过程正常情况下pH是逐渐下降的,所以只要上升了基本可以肯定染菌了。
29楼2012-07-27 15:01:02
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neu234

木虫之王 (文学泰斗)



铁人小强(金币+1): 谢谢参与
路过
10楼2012-07-20 08:57:10
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feiandqiang

银虫 (小有名气)



铁人小强(金币+1): 谢谢参与
你校正了吗
20楼2012-07-23 09:22:46
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铁人小强

木虫 (小有名气)


引用回帖:
20楼: Originally posted by feiandqiang at 2012-07-23 09:22:46
你校正了吗

电极校正是常识吧
23楼2012-07-24 07:58:36
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ddan

金虫 (小有名气)



铁人小强(金币+1): 谢谢参与
多了解一下
25楼2012-07-24 11:10:55
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简单回复
sush20122楼
2012-07-19 23:16   回复  
铁人小强(金币+1): 谢谢参与
shihao6114楼
2012-07-20 07:46   回复  
铁人小强(金币+1): 谢谢参与
2012-07-20 08:38   回复  
铁人小强(金币+1): 谢谢参与
郑克宁9楼
2012-07-20 08:45   回复  
铁人小强(金币+1): 谢谢参与
longway10211楼
2012-07-20 09:00   回复  
铁人小强(金币+1): 谢谢参与
brooksh12楼
2012-07-20 09:07   回复  
铁人小强(金币+1): 谢谢参与
2012-07-23 10:13   回复  
铁人小强(金币+1): 谢谢参与
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