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sdmissing

铁虫 (小有名气)

[求助] 怎样寻找突变基因

分子新手一枚,现有一株诱变后的抗生素高产菌,该菌种抗生素合成途径和相关基因均已明确,也已发现部分调控基因。现欲从基因水平寻找高产原因,在不进行基因组测序的情况下,如何才能尽快找到突变基因呢?望各位大侠不吝赐教,先行谢过,金币随后
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tiandizao

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
sdmissing: 金币+2, 谢谢回帖 2012-07-18 20:59:13
相关基因已经确定了,把这些相关基因都pcr获得后,再测序,和原基因对比就可以了吧
不断的修正问题,改正错误中走向永恒
4楼2012-07-18 15:43:45
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jl860822

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
sdmissing: 金币+2, 谢谢回帖 2012-07-18 14:28:23
现在蛋白水平上看,能找到相应蛋白就可以在NCBI搜索其对应的核酸序列,然后设计引物进行扩增,看是否其中的碱基发生突变
2楼2012-07-18 13:07:21
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sdmissing

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jl860822 at 2012-07-18 13:07:21
现在蛋白水平上看,能找到相应蛋白就可以在NCBI搜索其对应的核酸序列,然后设计引物进行扩增,看是否其中的碱基发生突变

实验室分子平台较为薄弱,很难做到蛋白水平的检测
3楼2012-07-18 14:29:58
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sdmissing

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by tiandizao at 2012-07-18 15:43:45
相关基因已经确定了,把这些相关基因都pcr获得后,再测序,和原基因对比就可以了吧

现在是不敢确定突变位点是否位于合成基因上,还有可能在调控基因,而且合成基因簇很大,90多kb,调控基因还未完全清楚
5楼2012-07-18 20:58:54
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