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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 水稻转基因方法之农杆菌介导法侵染时菌液浓度的问题
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zhouxw1987

铁虫 (初入文坛)

[求助] 水稻转基因方法之农杆菌介导法侵染时菌液浓度的问题

最近看农杆菌介导法转化水稻的文章中老是提到一个侵染时菌液浓度最佳OD=0.1，我想问问，这个OD值是我们培养农杆菌时菌液生长时的OD值，还是我们最终把菌液加入AAM液体培养基后AAM（含菌液）培养基的OD值？做了几年的转基因了，以前师姐告诉我用眼睛直接看就可以了，没有特别严格的要求，所以也没有特别去追究，但是，最近文章看多了，就想知道这个，请各位大侠帮助一下，万分感谢！！！一直没有搞懂这个问题，说来挺惭愧····
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1楼 2012-07-17 21:32:40
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没做过水稻，只做过农杆菌侵染拟南芥和烟草，那个OD=0.1，应该是最终侵染培养液的浓度
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2012-07-17 22:04:32
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zhouxw1987

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-07-17 22:04:32
没做过水稻，只做过农杆菌侵染拟南芥和烟草，那个OD=0.1，应该是最终侵染培养液的浓度

谢谢，怎么就没有其他人知道么？？？
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3楼2012-07-19 09:34:40
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namixie

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是最终的那个吧，不是很确定...
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也许你顺手的事，就能帮助别人，不也是一件有意义的事么。
4楼2012-07-20 08:49:08
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Crescendo

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般农杆菌在OD=0.5左右时侵染水稻愈伤为最佳。不知道OD=0.1是什么意思/
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日拱一卒，功不唐捐
5楼2012-07-20 11:45:55
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珊宝儿

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

我是转基因大豆的，但是我们的OD比较高，开始是要摇到OD=0.4-0.6才能继代的，这是活化菌的浓度，说是这个时候菌处于对数期，活性最好。重悬后菌液的的浓度是0.8，估计0.1是重悬后的浓度。不然刚活化的菌0.1活性也不好啊
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6楼2012-10-12 15:20:23
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雄鹰飞翔

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

呵呵，我是最水稻转化的，OD=0.1是农杆菌的最终浓度，也就是稀释后的浓度
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7楼2012-11-15 16:26:13
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orange_2047

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

在做转基因的时候，一般文章里说的用多少OD值的农杆菌菌液侵染外植体都是指的用AAM培养基重悬之后的浓度。比如，用YEB培养基摇农杆菌至OD值为0.5，用等体积的AAM培养基重悬之后的浓度就是0.5，两倍体积的AAM培养基重悬之后的浓度就是0.25。一般文章里指的都是重悬后的浓度。
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8楼2012-11-15 20:07:37
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红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

菌液加入AAM液体培养基后AAM（含菌液）培养基的OD值
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9楼2012-11-28 20:43:13
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zxl123588

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 红卫大兵 at 2012-11-28 20:43:13
菌液加入AAM液体培养基后AAM（含菌液）培养基的OD值

你好！我也是做水稻转化的，OD值指的是用YEP摇是的值，他代表的不是浓度，是农杆菌的活性。
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10楼2013-10-14 18:05:50
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