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jia8817091

金虫 (小有名气)

[求助] 关于实时定量PCR的问题!!!

小弟刚开始做real time 。现在有个问题,由于我的模板比较多,40多个,如果每个做2个平行的话就是90个左右。可是我们这bio-rad的荧光PCR是96孔,所以每次只能做一个基因。

我想问:1.可不可以这一次只做目的基因,下一次再全做内参基因呢?
        2.如果目的基因和内参基因的退火温度不一样,能不能一起分析啊?
谢谢大家帮帮我吧!
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shuanyu0202

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
jia8817091: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-07-17 18:27:27
一般来说做这种实验内参和目的基因都是同条件处理的,建议取一个比较集中的温度,把一个样本的所有基因都跑完,不行的引物再单独检测,当然同一个模板不同的板子不同的退火温度肯定都要设内参的。
4楼2012-07-17 14:00:34
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