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wzglnts木虫 (小有名气)
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用MRS培养基倒平板进行乳酸菌计数，直接将菌液涂在平板表面可以吗？已有1人参与
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| 用MRS培养基倒平板进行乳酸菌计数，直接将菌液涂在平板表面，这样乳酸菌是不是处于了有氧的环境中，乳酸菌会长吗？菌落计数准确吗？ |
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weiyasong
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【答案】应助回帖
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1. 焦性没食子酸法 焦性没食子酸在碱性溶液内能大量地吸收氧而造成厌氧环境，有 利于厌氧菌的生长繁殖。  通常 100cm3 空间用焦性没食子酸 1g 及 10％氢氧化钠或氢氧化钾 10m1。具体方法有下列几种： （1）平板培养法 将厌氧菌划线接种于适宜的琼脂平板，取一小团直径约 2cm 的脱脂 棉，置于平皿盖的内面中央，其上滴加 0.5ml 10％氢氧化钠溶液；在靠近脱脂棉的一侧放置 0.5g 焦性没食子酸，暂勿使两者接触。立即将已接种的平板覆盖于平皿盖上，迅速用融化的 石蜡密封平皿四周。封毕，轻轻摇动平皿，使被氢氧化钠溶液浸湿的脱脂棉与焦性没食子酸 接触，然后置 37℃恒温箱中培养 24～48h 后，取出观察。 （2）Buchner 氏试管法（图 4-4） 取一大试管，在管底放焦性没食子酸 0.5g 及玻璃珠 数个或放一螺旋状铅丝。将已接 种的培养管放入大试管中，迅速 加入 2％NaOH 溶液 0.5ml， 立即 将试管口用橡皮塞塞紧，必要时 周围用石蜡密封。 37℃培养 24～ 48h 后观察。 图4-4 Buchner氏厌氧培养法 图4-5 瑞氏厌氧培养法 （3）瑞氏厌氧培养法（图 4-5） 将已接种细菌的培养管的脱脂棉棉塞在火焰中灼烧 灭菌后，塞入管中离培养基 1～1.5cm 处，置适量焦性没食子酸于其上，加入 10%NaOH 溶 液 2ml，迅速用橡皮塞将管口塞紧，以胶泥或石蜡严密封闭置温箱中培养。 （4）史氏厌氧培养法 用图 4-6 所示的厌氧培养皿，在皿底一边置焦性没食子酸，另 一边置 NaOH 溶液，将已接种的平皿翻盖于皿上，并将接合处用胶泥或石蜡密封，然后摇 动底部，使氢氧化钠与焦性没食子酸混合，置温箱中培养。 （5）平皿厌氧培养法 置一片中有小圆孔的金属板于两平皿之间，上面的平皿接种细 菌，下面的平皿盛焦性没食子酸及氢氧化钠溶液，用胶泥封闭后置温箱中培养（图 4-7） （6）玻罐或干燥器法 置适量焦性没食子酸于一干燥器或玻罐的隔板下面，将培养皿 或试管置于隔板上，并在玻罐内置美兰指示剂一管，从罐侧加入氢氧化钠溶液于罐底，将焦 性没食子酸用纸或纱布包好，用 线系住，暂勿与氢氧化钠接触， 等一切准备好后，将线放下，使 焦性没食子酸落入氢氧化钠溶 液中，立即将盖盖好，密封，置 温箱中培养。 2 |
20楼2013-07-04 11:10:33
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10楼2012-07-29 14:56:19
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