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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 用MRS培养基倒平板进行乳酸菌计数，直接将菌液涂在平板表面可以吗？
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竞贤右

新虫 (初入文坛)
这个我做过，乳酸菌不是严格厌氧微生物，会所以涂布也会长，但是建议你，采用浇注的方式，温度50℃（大多平板在三角瓶有一点烫手，但能长时间握住的时候倒平板）左右的时候到平板，不会烫死，这样很多好氧微生物就不会生长，计数才准确
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11楼2012-07-29 15:45:49
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10710010234

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

用烛缸行不行啊？？
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烈日炎炎，我依旧呆在实验室
12楼2013-06-30 17:36:42
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zhang1zheng2

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

乳酸菌是兼性厌氧菌，直接涂板可以的。记得做10倍梯度稀释，并且每个稀释度涂3个平行的板。
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手握日月摘星辰，看透生死破凡尘
13楼2013-07-01 11:15:37
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weiyasong

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by 10710010234 at 2013-06-30 17:36:42
用烛缸行不行啊？？

用烛缸可以的，我就是用这个培养的，不过需要加焦性没食子酸和氢氧化钠
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14楼2013-07-01 13:34:10
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10710010234

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by weiyasong at 2013-07-01 13:34:10
用烛缸可以的，我就是用这个培养的，不过需要加焦性没食子酸和氢氧化钠...

你的乳酸菌菌落有多大啊？？我的很小很小，你一般培养多长时间啊？？
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烈日炎炎，我依旧呆在实验室
15楼2013-07-02 11:33:28
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weiyasong

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
15楼: Originally posted by 10710010234 at 2013-07-02 11:33:28
你的乳酸菌菌落有多大啊？？我的很小很小，你一般培养多长时间啊？？...

菌落不大，一般培养36-48小时
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16楼2013-07-02 12:09:18
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10710010234

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by weiyasong at 2013-07-02 12:09:18
菌落不大，一般培养36-48小时...

你的MRS培养基pH是多少啊？？我的菌落几乎就是肉眼不可见，你有没有用过染色啊？比如溴甲酚紫之类的？
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烈日炎炎，我依旧呆在实验室
17楼2013-07-02 16:18:41
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weiyasong

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
17楼: Originally posted by 10710010234 at 2013-07-02 16:18:41
你的MRS培养基pH是多少啊？？我的菌落几乎就是肉眼不可见，你有没有用过染色啊？比如溴甲酚紫之类的？...

MRS培养基pH是7.2左右，染色一般都是革兰氏染色，溴甲酚紫之类没有过
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18楼2013-07-02 16:52:27
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10710010234

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by weiyasong at 2013-07-02 16:52:27
MRS培养基pH是7.2左右，染色一般都是革兰氏染色，溴甲酚紫之类没有过...

你培养基里的焦性没食子酸和氢氧化钠的添加量是多少啊？？我的乳酸菌太小了没办法计数啊
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烈日炎炎，我依旧呆在实验室
19楼2013-07-03 21:47:27
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weiyasong

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
19楼: Originally posted by 10710010234 at 2013-07-03 21:47:27
你培养基里的焦性没食子酸和氢氧化钠的添加量是多少啊？？我的乳酸菌太小了没办法计数啊...

1. 焦性没食子酸法 焦性没食子酸在碱性溶液内能大量地吸收氧而造成厌氧环境，有 利于厌氧菌的生长繁殖。通常 100cm3 空间用焦性没食子酸 1g 及 10％氢氧化钠或氢氧化钾 10m1。具体方法有下列几种： （1）平板培养法 将厌氧菌划线接种于适宜的琼脂平板，取一小团直径约 2cm 的脱脂 棉，置于平皿盖的内面中央，其上滴加 0.5ml 10％氢氧化钠溶液；在靠近脱脂棉的一侧放置 0.5g 焦性没食子酸，暂勿使两者接触。立即将已接种的平板覆盖于平皿盖上，迅速用融化的 石蜡密封平皿四周。封毕，轻轻摇动平皿，使被氢氧化钠溶液浸湿的脱脂棉与焦性没食子酸 接触，然后置 37℃恒温箱中培养 24～48h 后，取出观察。 （2）Buchner 氏试管法（图 4-4） 取一大试管，在管底放焦性没食子酸 0.5g 及玻璃珠 数个或放一螺旋状铅丝。将已接 种的培养管放入大试管中，迅速 加入 2％NaOH 溶液 0.5ml， 立即 将试管口用橡皮塞塞紧，必要时 周围用石蜡密封。 37℃培养 24～ 48h 后观察。 图4-4 Buchner氏厌氧培养法 图4-5 瑞氏厌氧培养法 （3）瑞氏厌氧培养法（图 4-5） 将已接种细菌的培养管的脱脂棉棉塞在火焰中灼烧 灭菌后，塞入管中离培养基 1～1.5cm 处，置适量焦性没食子酸于其上，加入 10%NaOH 溶 液 2ml，迅速用橡皮塞将管口塞紧，以胶泥或石蜡严密封闭置温箱中培养。 （4）史氏厌氧培养法 用图 4-6 所示的厌氧培养皿，在皿底一边置焦性没食子酸，另 一边置 NaOH 溶液，将已接种的平皿翻盖于皿上，并将接合处用胶泥或石蜡密封，然后摇 动底部，使氢氧化钠与焦性没食子酸混合，置温箱中培养。 （5）平皿厌氧培养法 置一片中有小圆孔的金属板于两平皿之间，上面的平皿接种细 菌，下面的平皿盛焦性没食子酸及氢氧化钠溶液，用胶泥封闭后置温箱中培养（图 4-7） （6）玻罐或干燥器法 置适量焦性没食子酸于一干燥器或玻罐的隔板下面，将培养皿 或试管置于隔板上，并在玻罐内置美兰指示剂一管，从罐侧加入氢氧化钠溶液于罐底，将焦 性没食子酸用纸或纱布包好，用 线系住，暂勿与氢氧化钠接触， 等一切准备好后，将线放下，使 焦性没食子酸落入氢氧化钠溶 液中，立即将盖盖好，密封，置 温箱中培养。 2
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20楼2013-07-04 11:10:33
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