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peijiawai

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助,RNA提取方法 已有1人参与

矮牵牛总RNA叶片的提取方法,谁有,可以介绍一下吗?
电泳的时候用非变性胶。
总是提不出来,我用的是传统的trizal方法

[ Last edited by peijiawai on 2012-7-14 at 06:48 ]
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sesame_oil

荣誉版主 (文坛精英)

优秀版主优秀版主

不是哥不笑,一笑粉就掉
2楼2012-07-14 23:12:03
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zhuhaoyong30649

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
TRIzol法,样品要研磨充分,不要贪多!其他的都知道的了!祝你成功!
3楼2012-07-15 07:56:51
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peijiawai

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhuhaoyong30649 at 2012-07-15 07:56:51
TRIzol法,样品要研磨充分,不要贪多!其他的都知道的了!祝你成功!

谢谢,但是提了一共8次,全部都是降解的,没有可用的RNA
4楼2012-07-15 08:55:34
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jl860822

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
silicare: 金币+3, BioEPI+1 2012-07-19 09:13:05
我强烈建议你看一下Invitrogen的官网,仔细看胰腺癌,其实Trizol适合提取动物组织或者细胞的总RNA,但是可能并不太适合做植物组织的RNA提取,可能是植物细胞由细胞壁的原因吧,这个我说不好,但是我建议你换一下方法,Invitrogen的试剂不错的
5楼2012-07-15 12:01:00
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peijiawai

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by jl860822 at 2012-07-15 12:01:00
我强烈建议你看一下Invitrogen的官网,仔细看胰腺癌,其实Trizol适合提取动物组织或者细胞的总RNA,但是可能并不太适合做植物组织的RNA提取,可能是植物细胞由细胞壁的原因吧,这个我说不好,但是我建议你换一下方法 ...

但是我们实验室用这种方法提拟南芥的RNA没有问题啊
6楼2012-07-15 13:36:17
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tupac225

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
在提取缓冲液中加入皂土有效地去除了蛋白质并抑制RNAse,你可以试试这个方法。植物的RNA提取做好用异硫氰酸胍法。
coasttocoast。
7楼2012-07-15 15:00:26
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hpzinc65

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yqbter: 金币+2, 鼓励发帖! 2012-07-15 20:39:35
我们提植物的RNA都是用trizol,如果是降解的话你应该多注意细节,RNA酶在外界环境中很多,RNA确实比DNA容易降解多了。实在还提不出来可以试试CTAB,我以前也用过,或直接买试剂盒,比较节省时间
8楼2012-07-15 19:01:30
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淘气维尼89

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我们实验室用的是异硫氰酸胍方法提的
9楼2012-07-15 23:36:32
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peijiawai

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 淘气维尼89 at 2012-07-15 23:36:32
我们实验室用的是异硫氰酸胍方法提的

能具体说一下吗
10楼2012-07-16 15:22:13
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