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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 为什么DGGE染色出来是这个样子，高手帮忙分析下原因吧？
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
wangning__: 金币+10, ★有帮助 2012-07-19 18:09:26
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 分析的很全面哦 2012-07-20 13:45:41
1）这个是我做出来的图，你帮忙看一下，中间很粗的是怎么回事呢？
带很粗说明拷贝数比较高。
2）条带之间这么模糊时什么原因呢，会不会和PCR结果有关呢？如果有关，该怎么改进呢？附上PCR的图。
带模糊，可以提高点退火温度，将循环数稍微降低一点。
我配胶用的都是国产的，有的说必须用进口的，是这样吗？你们是使用的哪个公司的呢？
我觉得这个关系不大。
3）是不是PCR过后最好直接就DGGE呢？
是的。
4）切胶后是不是直接放到离心管中，加入去离子水，放置在4℃就好了呢？大概可以放置多久啊？
切胶后最好马上做完，用不了多点时间。如果有急事，可以4℃放置过夜是可以。
5）我的样品比较多，可能要几块胶，那以后分析时，这几块胶可以对比分析吗？
没太明白。楼主的意思是用例如同样的引物不同模板跑出的结果吗？如果是这样的话，是可以用于分析的，但是前提是你最好每板上都加marker，阴阳对照，然后，跑胶的所有条件尤其是时间都一致，这样才好比较，否则，迁移时间不一致，不好分析。
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3楼2012-07-19 17:07:28
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