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yajune铁杆木虫 (职业作家)
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[求助]
关于ROS(活性氧）测定问题 已有1人参与
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| 想用用DCFH-DA法测斑马鱼大脑ROS含量，以前没做过，我看文献里基本都是用的荧光酶标仪测的，就是把反应物都加到酶标板里，然后37度反应30min就可以测了，但是我们实验室只有荧光分光光度计，也就是说只能一个样一个样的测。想问一下，用荧光分光度计可以测么，具体怎么操作呢？跪请做过或了解的大神回答一下，谢谢 |
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3楼2012-07-05 13:51:23
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amisking: 金币+3, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-07-05 20:38:17
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介个 你难道不是用试剂盒做的吗 我用的试剂盒激发波是488nm 发射波525左右 实验时波长段内扫描下就知道了 探针就是试剂盒里的东西 有的加入活性氧阳性对照试剂Rosup15-20min就可以检测发射荧光 有的要20-30min 具体的研究说明书就可以了 “活性氧检测试剂盒(Reactive Oxygen Species Assay Kit)是一种利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的试剂盒。DCFH-DA本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜，从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。 ” |
4楼2012-07-05 15:03:19
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