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Wynter

新虫 (初入文坛)

[求助] 新手求各位师兄师姐指教革兰氏阳性菌的RNA提取技巧

从今年年初开始一直在尝试提细菌RNA做定量。以前也听人说过比较难,很容易降解。开始的时候尝试用TriZol,后来就买Omega的细菌RNA提取试剂盒。手头上有两种菌,一种G+的一种G-的,G-的用试剂盒很好提,但是G+的怎么样也提不出来,壁太难破了。我把溶菌酶调到50mg/mL浓度培养了差不多一小时还是那个样子。我考虑再用蛋白酶K去培养,但是好像需要55℃,这么高温RNA都降解完了吧,该怎么办才好呢?求各位大神指点啊!!!
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神舟有梦

新虫 (初入文坛)

亲,你的阴性菌咋提的啊 我咋提不出来啊
只要心脏还在跳动,追梦的脚步就要前行。
3楼2015-04-28 17:09:10
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juzi0627

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也是G+,溶菌酶处理后。跑胶一条带都木....崩溃了。坐了好久都是这。郁闷....不过你处理一个小时那么久,会降解吧?我看有的处理20mg/ml,10min就能提出来。不解。
2楼2012-10-20 21:49:46
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