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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 新手求各位师兄师姐指教革兰氏阳性菌的RNA提取技巧
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Wynter

新虫 (初入文坛)

[求助] 新手求各位师兄师姐指教革兰氏阳性菌的RNA提取技巧

从今年年初开始一直在尝试提细菌RNA做定量。以前也听人说过比较难，很容易降解。开始的时候尝试用TriZol，后来就买Omega的细菌RNA提取试剂盒。手头上有两种菌，一种G+的一种G-的，G-的用试剂盒很好提，但是G+的怎么样也提不出来，壁太难破了。我把溶菌酶调到50mg/mL浓度培养了差不多一小时还是那个样子。我考虑再用蛋白酶K去培养，但是好像需要55℃，这么高温RNA都降解完了吧，该怎么办才好呢？求各位大神指点啊！！！
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1楼 2012-07-05 10:57:45
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juzi0627

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也是G＋，溶菌酶处理后。跑胶一条带都木....崩溃了。坐了好久都是这。郁闷....不过你处理一个小时那么久，会降解吧？我看有的处理20mg/ml,10min就能提出来。不解。
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2楼2012-10-20 21:49:46
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神舟有梦

新虫 (初入文坛)
亲，你的阴性菌咋提的啊 我咋提不出来啊
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只要心脏还在跳动，追梦的脚步就要前行。
3楼2015-04-28 17:09:10
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