4楼: Originally posted by jl860822 at 2012-07-09 11:03:37
我用的是可视Marker，转膜后可以清楚地看到，ECL混合后，我一般避光孵育3min左右，然后曝光3min，我用的是positive成像，但我觉得我的图片中的一片白不像是目的蛋白发出的荧光...

11楼: Originally posted by jacky1985310 at 2012-07-11 20:04:33
每次做都会有一片白吗？每次出现的位置是否一致？
如果不是蛋白的荧光那就不好说了。成像仪，夹膜的透明薄膜是否有问题?
排除了器具问题，就是试剂和操作了。
抗体效价如何？浓度也不能完全按照说明书来的，因为 ...

12楼: Originally posted by tiger234 at 2012-07-11 23:41:34
没用过这个牌子的二抗。1:3000肯定算高的了，而且你洗的时间太短。如果我摸索条件，肯定起始二抗浓度1:10000，洗至少3次，每次10分钟，然后慢慢曝光。

14楼: Originally posted by jl860822 at 2012-07-12 09:00:58
1:10000？二抗浓度太低了吧！？我现在都是用1:2000左右...

18楼: Originally posted by fxh1229 at 2012-10-30 22:46:07
楼主最后是怎么解决问题的？我最近也遇到与你相同的问题，想请教一下。