24小时热门版块排行榜    

查看: 2496  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

dy_414

木虫 (正式写手)

[求助] 盐酸胍复性的问题

首先祝大家实验顺利!

最近在做盐酸胍变性蛋白的复性工作(之前是尿素作为变性剂,但是新蛋白尿素不能溶解,盐酸胍可以),发现大多数蛋白全部沉淀了。试过盐酸胍梯度和TGE复性液(之前别的蛋白的复性都非常好),用过8.1, 7.4, 6.2, 5.2四个浓度的缓冲液,结果只是TGE+pH6.2时有大约4%的回收率。请问大家,有没有遇到过类似问题,或者有没有好的方法?

谢谢!
回复此楼
我坚信,rp是攒出来的
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dy_414

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by shoppinggirl at 2012-07-17 18:21:52
大多数蛋白沉淀无所谓的,要看你缓冲液的pH,你目的蛋白的pI是多少呢,相差1-2个等电点比较保险。

我蛋白的PI预测是在8.9,我分别试过8.1, 7.4, 6.2和5.2,结果都是一样的
我坚信,rp是攒出来的
5楼2012-07-18 09:39:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

dy_414

木虫 (正式写手)

自己再顶一下哈!
我坚信,rp是攒出来的
3楼2012-07-17 13:39:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shoppinggirl

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

大多数蛋白沉淀无所谓的,要看你缓冲液的pH,你目的蛋白的pI是多少呢,相差1-2个等电点比较保险。
4楼2012-07-17 18:21:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +5 tcxiaoxx 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:35 by laoshidan
[考研] 求调剂 +5 Mqqqqqq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:46 by zhukairuo
[考研] 一志愿北京化工大学0703化学318分,有科研经历,求调剂 +4 一瓶苯甲酸 2026-03-14 4/200 2026-03-20 20:36 by fen_rao
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
[考研] 353求调剂 +3 拉钩不许变 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:56 by JourneyLucky
[考研] 271材料工程求调剂 +7 .6lL 2026-03-18 7/350 2026-03-20 09:10 by xingguangj
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考研] 081700化工学硕调剂 +3 【1】 2026-03-16 3/150 2026-03-19 23:40 by edmund7
[考研] 材料与化工求调剂 +7 为学666 2026-03-16 7/350 2026-03-19 14:48 by 尽舜尧1
[考研] 085600材料与化工求调剂 +6 绪幸与子 2026-03-17 6/300 2026-03-19 13:27 by houyaoxu
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +5 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 6/300 2026-03-18 17:53 by 无际的草原
[考研] 311求调剂 +11 冬十三 2026-03-15 12/600 2026-03-18 14:36 by 星空星月
[考研] 297求调剂 +8 戏精丹丹丹 2026-03-17 8/400 2026-03-18 14:30 by laoshidan
[考研] 材料,纺织,生物(0856、0710),化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考研] 302求调剂 +4 小贾同学123 2026-03-15 8/400 2026-03-17 10:33 by 小贾同学123
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历,论文在投 +7 腻腻gk 2026-03-14 7/350 2026-03-16 10:12 by houyaoxu
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
信息提示
请填处理意见