24小时热门版块排行榜    

查看: 2657  |  回复: 5

dy_414

木虫 (正式写手)

[求助] 盐酸胍复性的问题

首先祝大家实验顺利!

最近在做盐酸胍变性蛋白的复性工作(之前是尿素作为变性剂,但是新蛋白尿素不能溶解,盐酸胍可以),发现大多数蛋白全部沉淀了。试过盐酸胍梯度和TGE复性液(之前别的蛋白的复性都非常好),用过8.1, 7.4, 6.2, 5.2四个浓度的缓冲液,结果只是TGE+pH6.2时有大约4%的回收率。请问大家,有没有遇到过类似问题,或者有没有好的方法?

谢谢!
回复此楼
我坚信,rp是攒出来的
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dy_414

木虫 (正式写手)

自己顶一下哈
我坚信,rp是攒出来的
2楼2012-07-04 16:14:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dy_414

木虫 (正式写手)

自己再顶一下哈!
我坚信,rp是攒出来的
3楼2012-07-17 13:39:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shoppinggirl

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

大多数蛋白沉淀无所谓的,要看你缓冲液的pH,你目的蛋白的pI是多少呢,相差1-2个等电点比较保险。
4楼2012-07-17 18:21:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dy_414

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by shoppinggirl at 2012-07-17 18:21:52
大多数蛋白沉淀无所谓的,要看你缓冲液的pH,你目的蛋白的pI是多少呢,相差1-2个等电点比较保险。

我蛋白的PI预测是在8.9,我分别试过8.1, 7.4, 6.2和5.2,结果都是一样的
我坚信,rp是攒出来的
5楼2012-07-18 09:39:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

edoz1986

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

内容已删除
6楼2013-05-23 09:55:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dy_414 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] FileCode能看出啥? +8 要乐观耀哥 2026-08-10 23/1150 2026-08-13 00:35 by 要乐观耀哥
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +10 Tide man 2026-08-11 10/500 2026-08-12 20:59 by 陈晨晨陈啊
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] filecode +13 documentary 2026-08-10 15/750 2026-08-12 15:56 by 云上清扬
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
信息提示
请填处理意见