| 查看: 1874 | 回复: 15 | ||
[求助]
基因克隆
|
|
我设计的一对引物，第一次PCR扩增时，发现扩增出来了片段，但个人感觉条带太暗，怕回收不回来，就扔了。第二次做，同样的体系，同样的条件，P出来，连一条条带都没有。而且第一次的让师兄看了，一点都不暗，说是能回收回来的。 请问各位，这是什么原因呢？为什么同样的条件，同样的体系，就是做不出来呢。 |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有210人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
Marado
金虫 (正式写手)
Dreamer
- MolEPI: 2
- 应助: 81 (初中生)
- 金币: 1458.8
- 散金: 100
- 红花: 1
- 帖子: 430
- 在线: 196.7小时
- 虫号: 1512351
- 注册: 2011-11-27
- 专业: 生物化学
2楼2012-07-03 10:20:26
3楼2012-07-03 12:22:42
Marado
金虫 (正式写手)
Dreamer
- MolEPI: 2
- 应助: 81 (初中生)
- 金币: 1458.8
- 散金: 100
- 红花: 1
- 帖子: 430
- 在线: 196.7小时
- 虫号: 1512351
- 注册: 2011-11-27
- 专业: 生物化学
4楼2012-07-03 13:14:49
sd3824289
木虫 (正式写手)
- 应助: 47 (小学生)
- 金币: 2304.1
- 散金: 33
- 帖子: 740
- 在线: 105.5小时
- 虫号: 1657712
- 注册: 2012-03-02
- 专业: 生物化学
5楼2012-07-03 15:44:06
6楼2012-07-03 17:06:32
雅典娜1008
木虫 (著名写手)
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 4589.3
- 散金: 121
- 红花: 7
- 帖子: 1373
- 在线: 476.1小时
- 虫号: 708794
- 注册: 2009-02-25
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
7楼2012-07-03 17:10:51
kaikal
银虫 (小有名气)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 536.9
- 散金: 3
- 帖子: 95
- 在线: 25.6小时
- 虫号: 298976
- 注册: 2006-11-19
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
8楼2012-07-04 07:23:14
9楼2012-07-04 22:46:51
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-07-05 13:45:27
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-07-05 13:45:27
|
条带比较暗的原因，很可能是这两个：其一，引物特异性不好，如果设计的引物特异性很好的话，一般p出来的条带是很亮很亮的，不会觉得很暗；其二，模板浓度很低很低，这样的话，p出来的条带也会感觉很暗；解决方法有两个： 其一：把模板跑个电泳看看有无污染和查看模板浓度，如果出现的条带很暗，建议将模板浓缩下，再做pcr；其二，检查完模板没有问题的情况下，重新设计引物，将引物特异性提高，同时适当改变反应条件，p出来条带会很亮的，pcr 反应条件应该用 DNATap 聚合酶。 祝实验顺利~ |
10楼2012-07-05 09:57:35
