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蝈蝈1988

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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引用回帖:
9楼: Originally posted by hraikeyan at 2012-07-04 22:46:51
我所用的酶rTaq酶 ，我一直用的是touch-downPCR，有两次做出来了，并且每管都有，i之后做的18管就只有三四个有条带的，而且没有之前的亮。i
请问关于引物检测怎么检测？...

用extqa试一下吧，顺便加一点高保真，应该能出来。
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心态决定命运
11楼2012-07-05 10:34:41
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healy13

禁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
12楼2012-07-05 10:52:02
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sd3824289

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

如果体系中的某个东西换了，比如说taq酶换了，或者buffer换了，退火温度都会发生或多或少的变化！
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坚持，就像流星，即使知道最后的结果，也要勇敢的走到最后！
13楼2012-07-07 09:14:55
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chenxiang29
14楼2012-07-07 11:23:27
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陈年芬芳

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你用的touch-down PCR应该与退火温度没有太大关系，建议缩小体系体积，多做几管，在我的试验中也会碰到这样的问题，多多改进就好，可能与PCR仪空位置也有关系。
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15楼2012-07-07 13:00:55
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陈年芬芳

新虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 陈年芬芳 at 2012-07-07 13:00:55
你用的touch-down PCR应该与退火温度没有太大关系，建议缩小体系体积，多做几管，在我的试验中也会碰到这样的问题，多多改进就好，可能与PCR仪空位置也有关系。

做相同的几管，在PCR仪里位置不同，最后各管电泳图就可能不同，我碰到过几次。
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16楼2012-07-07 13:02:29
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