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蝈蝈1988

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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引用回帖:
9楼: Originally posted by hraikeyan at 2012-07-04 22:46:51
我所用的酶rTaq酶 ,我一直用的是touch-downPCR,有两次做出来了,并且每管都有,i之后做的18管就只有三四个有条带的,而且没有之前的亮。i
请问关于引物检测怎么检测?...

用extqa试一下吧,顺便加一点高保真,应该能出来。
心态决定命运
11楼2012-07-05 10:34:41
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healy13

禁虫 (小有名气)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

12楼2012-07-05 10:52:02
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sd3824289

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

如果体系中的某个东西换了,比如说taq酶换了,或者buffer换了,退火温度都会发生或多或少的变化!
坚持,就像流星,即使知道最后的结果,也要勇敢的走到最后!
13楼2012-07-07 09:14:55
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14楼2012-07-07 11:23:27
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陈年芬芳

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你用的touch-down PCR应该与退火温度没有太大关系,建议缩小体系体积,多做几管,在我的试验中也会碰到这样的问题,多多改进就好,可能与PCR仪空位置也有关系。
15楼2012-07-07 13:00:55
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陈年芬芳

新虫 (小有名气)

引用回帖:
15楼: Originally posted by 陈年芬芳 at 2012-07-07 13:00:55
你用的touch-down PCR应该与退火温度没有太大关系,建议缩小体系体积,多做几管,在我的试验中也会碰到这样的问题,多多改进就好,可能与PCR仪空位置也有关系。

做相同的几管,在PCR仪里位置不同,最后各管电泳图就可能不同,我碰到过几次。
16楼2012-07-07 13:02:29
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