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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于噬菌体侵染细菌
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lihao1988903

金虫 (正式写手)

[求助] 关于噬菌体侵染细菌

最近做的两次微生物发酵罐发酵都被噬菌体侵染了。我们做的是30L 大肠杆菌发酵，接种到发酵罐一切正常，菌种生长到一定OD后，溶氧就急剧上升并OD下降到1一下，菌液变清亮。因为第一次污染后专门对环境和设备又做了次消毒处理，结果第二次还是污染了。我想请问各位大虾，噬菌体会在什么时候侵染了大肠杆菌？侵染了大肠杆菌后多长时间才会释放出来使OD下降？因为接种以后，发酵罐没有开过口，会被污染吗？如果是滤器进去的为啥刚接种是没有呢？各位大虾分析下是什么时候被污染噬菌体的呢？
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1楼 2012-06-28 13:40:57
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李晓宏东华

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

，你可以先用没有污染的菌做涂布，菌浓度大培养使得形成菌苔，然后在菌苔表面涂几个点（用接种环）的怀疑污染了的培养基，培养，看看是否会出现溶菌现象。（既原来看到完整的菌苔，在接种后出现了空的溶菌斑）如果出现了溶菌现象则确实证明了是噬菌体。如果是噬菌体的话就比较讨厌了。需要对所有可能的物品进行消毒。（不是灭菌）包括房间，容器，器皿等等。
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5楼2012-06-28 20:24:08
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371522029

金虫 (正式写手)

小鱼儿

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+6, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-06-28 20:09:33
amisking: MicEPI+1 2012-06-28 20:09:41
首先我建议你不能这么武断的认为是噬菌体。接种的时候接种口用棉花蘸酒精点燃，然后接种。生长到OD值还没有下降，或者刚刚下降不久马上进行一次补料，补料后观察OD值是否继续下降，补料的培养基是很浓的，控制好体积，并灭好菌。补料后如果发现OD值只有少量上升，并且没维持多久就继续飞速下降那么就可能是污染了，补料后OD值上升，溶解氧下降，称现一定规律，则表明之前是培养基耗尽。
如果证明了有很大可能是污染为了确认，你可以先用没有污染的菌做涂布，菌浓度大培养使得形成菌苔，然后在菌苔表面涂几个点（用接种环）的怀疑污染了的培养基，培养，看看是否会出现溶菌现象。（既原来看到完整的菌苔，在接种后出现了空的溶菌斑）如果出现了溶菌现象则确实证明了是噬菌体。如果是噬菌体的话就比较讨厌了。需要对所有可能的物品进行消毒。（不是灭菌）包括房间，容器，器皿等等。
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3楼2012-06-28 19:38:32
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李晓宏东华

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-01 22:26:56
，你可以先用没有污染的菌做涂布，菌浓度大培养使得形成菌苔，然后在菌苔表面涂几个点（用接种环）的怀疑污染了的培养基，培养，看看是否会出现溶菌现象。（既原来看到完整的菌苔，在接种后出现了空的溶菌斑）如果出现了溶菌现象则确实证明了是噬菌体。如果是噬菌体的话就比较讨厌了。需要对所有可能的物品进行消毒。（不是灭菌）包括房间，容器，器皿等等。
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4楼2012-06-28 20:23:27
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421095972

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+3, 鼓励交流 2012-07-01 22:27:10
1.不要自溶了就说是噬菌体，你做了噬菌体检测了没有，没做就不要找借口。
2.确定不是噬菌体污染后，考虑下是不是菌种老化的原因，菌种长期保存最好放在液氮中。
3.另外培养基碳氮比，过程控制不好也都会产生细胞不生长和自溶的
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6楼2012-06-29 08:47:43
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