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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 花卉盆栽 » 微藻脂肪酸成分分析问题，样品在甲酯化前需要过柱子吗
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maomao809920

金虫 (小有名气)

[求助] 微藻脂肪酸成分分析问题，样品在甲酯化前需要过柱子吗

最近在做微藻粗脂提取，用氯仿甲醇法提取之后，得到的氯仿层在蒸干后，瓶底有些颗粒状物质，想问：
1、在甲酯化之后，这些颗粒物质是否能溶解；
2、若不能溶解是否要过柱子，什么柱子合适，如何过柱子，是否会影响脂肪含量；
3、用氯仿甲醇法会提取出很多的色素，色素含量是否会影响做气质或气相；
4、除了过柱子，粗脂中的色素如何去除。
5、大家除了使用索氏提取法和尼罗红之外用什么方法提取微藻中粗脂的效果好，又不含色素；
6、什么柱子合适测脂肪酸；
7、最后，买来标准品后，怎么配置？这方面完全空白。。。。

新手一枚，该课题我们学校也没人做，导师也不是很懂，问题很多，希望大侠们多多帮助！
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1楼2012-06-28 13:07:25
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maomao809920

金虫 (小有名气)
别沉了啊！
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2楼2012-06-29 10:28:07
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ylshao_hb

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
3楼2012-12-03 14:35:56
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spirin

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我把提取物正己烷溶解之后用5%氢氧化钠的甲醇酯化的，那些颗粒物可以溶解。

碱酯化之后色素不多，可以检测到少量叶绿醇，问题不大。提取油脂的方法都是对脂溶性物质全部提取，除色素只能提取之后处理。

标样浓度尽量接近你的样品浓度，一般用正己烷即可。
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4楼2012-12-04 17:29:58
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缺友情

荣誉版主 (文学泰斗)

此漂已死，有事烧纸 4-8

优秀版主

【答案】应助回帖

1、在甲酯化之后，这些颗粒物质是否能溶解；
应该来讲氯仿提取后都是油性物质了，不知道你那个颗粒物质是什么样的啊？要是仅仅是固态的油脂的话就完全不用担心。或则会不会是你氯仿提取的时候抽滤没抽好？
2、若不能溶解是否要过柱子，什么柱子合适，如何过柱子，是否会影响脂肪含量；
过柱子这个还真没做过
3、用氯仿甲醇法会提取出很多的色素，色素含量是否会影响做气质或气相；
色素肯定会有一些的，但是在甲酯化过程中应该难被甲酯的
4、除了过柱子，粗脂中的色素如何去除。
5、大家除了使用索氏提取法和尼罗红之外用什么方法提取微藻中粗脂的效果好，又不含色素；
我用的就是索氏抽提法
6、什么柱子合适测脂肪酸；

7、最后，买来标准品后，怎么配置？这方面完全空白。。。。
不知道你是指的什么标准品？要是定性标准品配置的话你只需要确定是什么物质就可了，到那个时间点出峰，那就是相应的脂肪酸了。要是定量标准品配置的话（内标），你需要精确的知道内标的浓度，溶液可以拿正己烷，另外你加内标的时候一定要准确的知道加了多少量的内标，同时需要根据你的脂肪样本量来粗略估计你需要加多少的内标，以确保内标的峰面积占总面积的3-8%左右。
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有些累了，淡了，该去了～
5楼2012-12-04 18:47:22
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vivian7777

银虫 (小有名气)
想请问楼主，所采用的的氯仿甲醇法，具体是如何操作的，谢谢！！
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6楼2014-06-24 13:59:55
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