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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » ChiP后的荧光定量出现问题，紧急求助。。。。标题要长。。。。
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heroyl

木虫 (正式写手)

[求助] ChiP后的荧光定量出现问题，紧急求助。。。。标题要长。。。。

RT，做染色质免疫共沉淀后用天根的胶回收试剂盒纯化DNA，测DNA浓度，稀释到0.5ng/ul，然后做荧光定量，可是做出来后却发现两个重复孔之间的数值相差较大，加样时的操作肯定没有问题，求高人解释下这是这会是由什么原因造成的，谢谢。
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实验虐我千百遍，我待实验如初恋
1楼 2012-06-28 08:54:22
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sk_yb

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
heroyl: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-06-28 13:44:23
chip下来的样品没有溶解均匀，即便加样很准确也会有很大误差。
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4楼2012-06-28 10:56:47
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l68266152

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
heroyl: 金币+1, ★有帮助 2012-06-28 09:11:38
如果确定操作没有问题的话，就是多做，熟练了就好了
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相信自己
2楼2012-06-28 09:06:58
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heroyl

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by l68266152 at 2012-06-28 09:06:58
如果确定操作没有问题的话，就是多做，熟练了就好了

但是如上所述，这个两个孔之间的重复性有点差啊！！
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实验虐我千百遍，我待实验如初恋
3楼2012-06-28 09:11:32
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heroyl

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sk_yb at 2012-06-28 10:56:47
chip下来的样品没有溶解均匀，即便加样很准确也会有很大误差。

按理来样品应该溶解没问题的啊，我不是用的沉淀的方法，是用柱子纯化的啊！是不是浓度低了DNA会不均一呢？
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实验虐我千百遍，我待实验如初恋
5楼2012-06-28 13:44:13
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