10楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-06-20 15:31:32
阴性的Ct值在35以上就可以认为没问题了。微弱的非特异结合（错配、二聚体等）在多个循环之后可能有一些扩增的，如果阴性对照在35个循环之后才出现的扩增，一般认为是正常的。楼主不放心的话，可以把阴性对照的产物拿 ...

6楼: Originally posted by 欧朵拉 at 2012-06-20 14:00:31
水没有问题，阳性曲线单峰，而且峰型也很好看，NTC有扩增，可是根据标准，如果在35个循环后还是起峰就判定是阳性，这样明显有问题啊··········...

14楼: Originally posted by xiayongxiu at 2012-06-22 10:20:50
引物有扩增很正常，可能是引物二聚体，在严格意义上是要重新设计引物的，不过你的阳性很好，单峰，说明引物对于你的目的基因是可以的啊。如果你要弄清楚NTC的扩增是什么，可以拿去测序。一般好的文章，做QPCR，结果 ...

13楼: Originally posted by thy1987110 at 2012-06-22 04:32:29
这个得看你的峰形是不是S线，如果不是的话基本可以忽略。你可以看看溶解曲线怎样，如果与阳性的峰不是在同一水平位出现的话那就证明是非特异扩增了。扩增后期是会出现非特异性扩增的，完全不影响你的实验。如果实在 ...

15楼: Originally posted by 孙启亮 at 2012-06-22 16:50:49
可以忽略不计，PCR是很敏感的，有时候你就是用水，也会跑出曲线来。但出现这种情况的原因很难解释。如果楼主用内参的引物做NTC，结果很可能跑出曲线来，但是由于CT值相差很大，所以不影响定量的，楼主可放心

15楼: Originally posted by 孙启亮 at 2012-06-22 16:50:49
可以忽略不计，PCR是很敏感的，有时候你就是用水，也会跑出曲线来。但出现这种情况的原因很难解释。如果楼主用内参的引物做NTC，结果很可能跑出曲线来，但是由于CT值相差很大，所以不影响定量的，楼主可放心